癌基因与抑癌基因.pptx

癌基因与抑癌基因;? 正常细胞具有接触抑制、生长因子依赖、锚定依赖生长 等特点。 ? 接触抑制(contact inhibition): 正常细胞在适当的体外培养 条件下, 虽能增殖分裂，但相互接触后，即停止分裂。 ? 锚定依赖生长(anchorage-dependent growth)：正常贴壁 生长的细胞必须依附在固体基质上才能生长，将它们悬 浮在含培养液的固体培养基中不能增殖。 ? 锚定非依赖生长(anchorage-independent growth) ：细胞 被转化后，能不依赖固体基质，在半固体(琼脂、甲基纤 维素)培养基中增殖形成细胞集落---软琼脂(soft agar)集落 形成实验。是细胞恶性转化的重要征象。 ? 致瘤性(tumorigenicity): 转化细胞移植到敏感动物体内后 能长出肿瘤的能力。常用裸鼠皮下接种。;? 永生化(Immortalization): 细胞从增殖衰老危机中逃离而具 无限增殖能力的过程。 特征：无致瘤性、接触抑制、生长因子依赖、锚定依赖生长 ? 转化(Transformation ): 细胞获得致瘤能力的过程。;;;存在于病毒（大多数是逆转录病毒）基因组，可以使靶 细胞发生恶性转化的基因； 不编码病毒的结构成分，对病毒复制也没有作用。;7;8;9;? 1 组 常 性;;12;癌基因的发现 —— 病毒癌基因;1974年：;病毒癌基因的起源;;;How Src works?;19;;1979年： Weinberg实验室通过转染提出小鼠基因组中 含有可使NIH3T3发生转化的DNA片段。;癌基因的发现 —— Ras;;;? K-Ras, H-Ras, N-Ras分别定位于11、12、1号染色体;;;;;遗传性肿瘤的研究;肾母细胞瘤（ Wilms瘤，WT) 婴幼儿肾脏恶性胚胎性肿瘤 ，患者腹部有肿块。 3/4的肿瘤发生在4岁以前，90%在20岁前发生。 可分为遗传型和非遗传型。 遗传性（家族性） 非遗传性（散发型）;同是一种肿瘤, 为什么既有遗传型又有散发型? 发病年龄也不同呢?;;二次打击假说;? 在非遗传性病例中，两次突变均为体细胞突变； ? 须在同一个体细胞中两次独立发生才能完成启动 的过程； ? 机会较少，需经漫长过程的积累。 非遗传性肿瘤多为单发，且发病较晚。;为什么正常细胞转化为恶性细胞需要两次以上的突 变事件的发生？ ? 正常人～1014个细胞，人的一生中进行～1016次细胞 分裂，自发突变频率为～1.4×10-10，环境致突变剂 的影响使突变频率要远高于该数值 ? 如单个突变可致癌，仅据自发突变率计算，人一生中 大约有28％细胞将癌变，那么癌症将是日常事件。;二次打击假说解释RB的发病机制;;;;;;;;;;第一个TSG的克隆 —— RB1;基因;49;50;;基因突变;;;55;DNA甲基化改变;肿瘤细胞中大部分TSG的失活是由启 动子的异常甲基化引起的;3.3 在人类肿瘤细胞基因组中发生超甲基化的基因;;甲基化的研究方法;亚硫酸氢钠依赖的基因测序;Bisulfite Sequencing;组蛋白修饰;组蛋白修饰;癌基因扩增（gene amplification）;乳腺癌中ERBB2的扩增;人类肿瘤中癌基因的扩增;染色体易位、基因重排;原癌基因可被染色体易位激活;染色体易位可创造新的融合蛋白;;;;;75;;癌基因协作的实验证据;78;79;80;81;APC的功能： 通过调节Wnt信号通路抑制细胞增殖;;看护者(Caretaker);DNA的复制不准确，可能造成癌变;DNA聚合酶的校对功能;看护者- DNA修复基因MSH2;p53基因的发现历程 ? 1979 SV40-LT抗原与一分子量为53 ￣ 54 KDa的蛋白质结合， 在肿瘤细胞核中大量积累----p53 转化细胞中的p53蛋白高表达，非转化细胞中它们的表 达量很低，甚至不表达。 肿瘤细胞来源的p53能与Ras一起共同使大鼠胚胎成纤维 细胞发生转化 Oncogene? 80年代末 肿瘤细胞中大量表达的是p53的mutant Tumor suppress gene !;;看护者- 维持基因组稳定性的基因p53;看护者- 维持基因组稳定性的基因p53;p53的调控通路－上游调控通路;p53的调控通路－下游调控通路;;95;96;庭院设计者（Landscaper）：SMAD4;SMAD4的功能;;;;