试管苗快速繁殖.pptxVIP

试管苗快速繁殖会计学第2页/共55页2.1.2 试管苗快速繁殖的一般程序 一般选择根、茎、叶器官为培养材料进行培养、壮苗与生根培养、试管苗驯化与移栽几个环节。第3页/共55页2.2 器官培养2.2.1 根的培养 ①研究根系生理代谢的优良实验体系 ②研究营养吸收、生长和代谢的变化规律③建立快速生长的根无性系 ④进行诱变育种第4页/共55页 2.2.1.1 根无性繁殖性的建立侧根接后1周根无性繁殖系反复转接无菌种子1.2cm第5页/共55页2.2.1.2 培养 多为无机离子浓度低的怀特培养基。也可用2／3 MS或1／2MS、B5培养基 注：离体根生长要求 提供全部必需元素，蔗糖、硝态氮效果好，加入B1、B6最重要，生长素对离体根影响不一致。培养温度25－27℃，暗光培养。 第6页/共55页2.2.2 茎尖培养概念：切取茎的先端或茎尖分生组织进行无菌培养。 意义：微茎尖培养可获得脱毒苗；茎尖培养技术简单，操作方便，易成活，成苗时间短，加快繁殖。　　 第7页/共55页 茎尖培养的类型　类型：根据培养目的和取材大小分为：微茎尖培养;普通茎尖培养 普通茎尖指几毫米到几十毫米的芽尖及侧芽。微茎尖为0.3-0.5mm材料处理及消毒培 养取材第8页/共55页 茎尖培养的方法接　种第9页/共55页2.2.2.1 取材取1-2㎝顶梢①直接取材：在生长旺盛、枝条健壮、无病的母株上选生长不久、杂菌污染少的顶梢（1－2cm）（取前可喷杀菌药，可顶芽或侧芽）。 ②从试管苗获取。　　第10页/共55页2.2.2.2 材料处理及消毒 ①顶梢切割成0.5-1.0cm的茎尖（除叶,剥去休眠芽的鳞片） 　②茎尖流水冲洗2-4h 　③75%酒精迅速漂洗30s 　④0.1%升汞或稀释20倍的次氯酸钠液消毒5-8min(取自老枝条上的可适当延长时间）　第11页/共55页2.2.2.3 接种接前可再剥去一些叶片。然后随切随接，动作迅速。亦可将切下茎尖材料在1-5% VC液中浸一下。　　 第12页/共55页2.2.2.4 培养培养基　　 ①基本培养基：MS、White、B5、Heller。②蔗糖作碳源效果好，浓度2－3%。③激素和有机添加物有明显影响。但激素浓度以0.1mg/L为宜，不要太高。　　　　　第13页/共55页 培养条件①光强：1000－3000lx；光照时间：16h。②温度：25℃左右③ 昼夜温差有或无，以植物或培养过程来定④ 干燥季节注意保湿。第14页/共55页2.2.3 茎段的培养第15页/共55页2.2.3.1 材料选择与处理 嫩枝去叶，剪3-4cm长 水冲洗1-3h,75%酒精30-60s， 0.1% 升汞3-8min(饱和漂白粉液10-20min，无菌水冲洗数次。第16页/共55页2.2.3.2 接种与培养培养基：MS 腋芽增殖效果 ：BA KT、ZT，生长素改善苗生长，GA促芽伸长。注意激素配比。继代增殖途径：促腋芽快速生长；诱导形成不定芽。第17页/共55页2.2.3 叶的培养1.成苗途径与意义 2.材料选择与消毒 3.接种 4.培养 第18页/共55页2.2.3.1 材料选择与灭菌幼嫩叶片流水冲洗 70-75%酒精漂洗10s饱和漂白粉液浸3-15min（或在0.1%升汞液5-8min） 无菌水冲洗多次后，用无菌滤纸吸干水分 第19页/共55页2.2.3.2 接种外植体大小： 5×5mm薄片上表皮朝上接种培养基。最好带叶脉，注意极性 第20页/共55页2.2.3.3 培养 培养基：MS、B5、White 、N6；蔗糖3%；2.4－D利于愈伤组织形成，NAA抑制芽形成，利于根发生，KT、6BA利于芽形成。 培养条件：25－28℃，10－14h光照，1500-3000lx （不定芽分化和生长再强些）。 2.2.4.4 植株再生途径 第21页/共55页直接产生不定芽形成愈伤组织形成胚状体其他途径 2.3 壮苗和生根培养第22页/共55页 2.3.1 试管苗的壮苗培养 较高浓度的生长素与较低浓度的细胞分裂素组合有利于形成壮苗. 在生产实际中，增殖系数控制在 3.0-5.0时可实现增殖和壮苗的双重目的。另外，改善培养室环境条件，如增加光照强度、降低湿度等对培养壮苗也有一定帮助。第23页/共55页2.3.2 试管苗的生根培养生根培养基：1／2或1／4MS基本培养基；不加或少加CTK，适量添加NAA；糖浓度1-1.5%。培养条件：增加光强，达3000-10000lx。2.3.2.1 生根方法与途径第24页/共55页将新梢基部浸入50 ppm或100 ppm IBA溶液中处理 4-8h；在含有生长素的培养基中培养 4-6d直接移入含有生长素的生根培养基中。容易生根的植物，延长在增殖培养基中的培养时间即可生根；适当降低增殖倍率，减