微生物的生长及控制.pptxVIP

会计学; 个体生长→个体繁殖→群体生长 群体生长＝个体生长＋个体繁殖 在微生物的研究和应用中，只有群体的生长才有实际意义。 微生物的生长繁殖是其在内外各种环境因素相互作用下的综合反映。 ;第一节 测定生长繁殖的方法;稀释倒平板法 ;（二）、平板划线分离法 ;（三）、单孢子或单细胞分离法 ;（四）、选择性培养基分离法 ;二、微生物生长繁殖的测定;（一）测生长量;比浊法;生理指标测定法;(二)计繁殖数 ;1、直接法 ;利用血球计数板，在显微镜下计算一定容???里样品中微生物的数量。 ;2、间接法;平板菌落计数法 ;第17页/共134页;优点： 适用于多种材料； 菌数较少也能准确测定。 缺点： 并非所有微生物在试验期间都能长出菌落； 意外的损伤可能导致菌落减少； 肉眼无法观察的菌落。;厌氧的菌落计数法;一、同步培养 ;同步培养方法 ;硝酸纤维素滤膜法;机械法： 优点：不影响细菌代谢； 缺点：不能用于即使是相同发育阶段个体大小不一致的微生物。 诱导法： 优点：方法多、应用范围广； 缺点：对细菌代谢有影响。 ; 将少量单细胞的纯培养物接种于一恒定容积的新鲜培养基中在合适条件下进行培养，在不补充营养物质或移去培养物，保持整个培养液体积不变条件下，以时间为横坐标，以菌数为纵坐标，根据不同培养时间时细菌数量的变化，可以作出一条反映细菌在整个培养期间菌数变化规律的曲线。;生长曲线可分：;（一）延滞期（lagphase） ; 延滞期的出现，可能是因为在接种到新鲜培养液的细胞中，一时还缺乏分解或催化有关底物的酶、辅酶或是缺乏充足的中间代谢物。为产生诱导酶或合成有关的中间代谢物，就需要有一段适应期，于是出现了生长的延滞期。 ;影响延滞期长短的因素 菌种 接种龄 接种量 培养基成分 ; 在工业发酵和科研中通常采取一定的措施缩短延滞期：;（二）指数期（exponentialphase） ;繁殖代数（n） ;生长速率常数（R）;例：设大肠杆菌在接种时的细胞浓度为100个/mL，经过400min的培养细胞浓度增至10亿个/mL，求该菌的繁殖代数和世代时间。 解：n = 3.322 ( lg x 2 ? lg x1 ) = 3.322 ( lg 109 ? lg102) =23.2 G=1/R= ( t1 ? t2 )/ 3.322 ( lg x 2 ? lg x1 ) = 17.3;影响指数期微生物代时的因素;大肠杆菌： 12.5-17min 枯草芽孢杆菌： 26-32min 嗜热乳杆菌： 66-87min 结核分枝杆菌： 792-932min 梅毒密螺旋体： 1980min ;大肠杆菌： 牛奶 12.5min 肉汤 17min 产气肠杆菌： 肉汤或牛奶 16-18min 组合 29-44min 乳酸链球菌： 牛奶 26min 乳糖肉汤 48min; 对数生长期的细菌个体形态、化学组成和生理特性等均较一致，代谢旺盛、生长迅速、代时稳定，所以是研究微生物基本代谢的良好材料，也是增殖噬菌体的最适宿主。 对数生长期的细菌常在生产上用作种子，使微生物发酵的迟缓期缩短，提高经济效益。;（三）稳定期（stationaryphase） ;稳定期到来的原因;稳定期的细胞行为;获得更多的菌体物质或代谢产物采取措施：;（四）衰亡期（declinephase或deathphase） ;特点： 细胞形态多样，例如会产生很多膨大、不规则的 退化形态； 有的微生物因蛋白水解酶活力的增强就发生自溶 （autolysis）； 有的微生物在这时产生或释放对人类有用的抗生 素等次生代谢产物； 在芽孢杆菌中，芽孢释放往往也发生在这一时期;三、微生物的连续培养 ;连续培养器 ;恒浊器（turbidostat） ;通过连续培养装置中的光电系统控制培养液中菌体浓度恒定、使细菌生长连续进行的一种培养方式。 ;恒化器（chemostat） ; 生长速率的控制因子：一般是氨基酸、氨和铵盐等氮源，或是葡萄糖、麦芽糖等碳源或者是无机盐，生长因子等物质。 恒化器连续培养通常用于微生物学的研究工作： 从遗传学角度，允许作长时间的细菌培养而从中分离不同的