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- 2022-02-24 发布于广东
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药敏试验报告(琼脂稀释法)
一、实验目的
检测载铜离子土对沙门氏菌的最小抑菌浓度(MIC)
二、实验原理
三、实验材料与试剂
材料:平板,锥形瓶,10mL EP管等;
试剂:载铜离子土,沙门氏菌,琼脂平板计数培养基,MH肉汤培养基,硫酸(1%),氯钡(0.25%)。
四、实验方法
1 配制琼脂平板计数培养基,按配方配制300mL,MH肉汤培养基100mL,待高压;
2 高压灭菌平板,锥形瓶,10mL EP管等;
3 沙门氏菌扩大培养:10ml EP管中加入 4ml MH肉汤培养基,4ul 菌液,放置摇床37℃,220rpm过夜培养;
4 麦氏比浊管0.5 的制备:0.25%氯化钡0.1ml,1%硫酸4.9ml。
(即细菌的近似浓度为×108/ml)
5 将扩大培养的沙门氏菌调制0.5麦氏比浊度后,再稀释100倍备用;
6 按下列表格的稀释倍数稀释:
实验组
1
2
3
4
5
对照组
载铜离子土终浓度(g/L)
1
2
3
5
7
0
稀释后菌液(ml)
1
1
1
1
1
1
载铜离子土(g)
0.02
0.04
0.06
0.10
0.14
0
琼脂平板计数培养基(ml)
19
19
19
19
19
19
(每组做三个重复,16-24h后观察结果)
五、实验结果
实验组1、2 以及对照组平板中,肉眼可见针尖状半透明菌落,革兰氏染色后,镜下形态为红色短杆状,初步断定为沙门氏菌;实验组3、4、5未见菌落,涂片染色后,镜下也未观察到细菌。
六、结论
载铜离子土对沙门氏菌最小抑菌浓度(MIC)为3g/L。
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