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培养基的制备 主要内容 第一节、培养基的类型及功能 第二节、工业发酵培养基 第三节、淀粉水解糖的制备 第四节、其他原料 培养基: 是提供微生物生长繁殖和生物合成各种代谢产物所需要的、按一定比例配制的多种营养物质的混合物。 发酵培养基的作用: 满足菌体的生长 促进产物的形成 斜面培养基 作用:这是供微生物细胞生长繁殖用的,包括细菌,酵母等的斜面培养基以及霉菌、放线菌生孢子培养基或麸曲培养基等。这类培养基主要作用是供给细胞生长繁殖所需的各类营养物质。 特点: 1.富含有机氮源,少含或不含糖分。有机氮有利于菌体的生长繁殖,能获得更多的细胞。 2.对于放线菌或霉菌的产孢子培养基,则氮源和碳源均不宜太丰富,否则容易长菌丝而较少形成孢子。 3.斜面培养基中宜加少量无机盐类,供给必要的生长因子和微量元素。 种子培养基(包括摇瓶种子和小罐种子培养基): 培养种子的目的: 1.扩大培养,增加细胞数量; 同时也必须培养出强壮、健康、活性高的细胞。为了使细胞迅速进行分裂或菌丝快速生长。 种子培养基特点: 1. 必须有较完全和丰富的营养物质,特别需要充足的氮源和生长因子。 2. 种子培养基中各种营养物质的浓度不必太高。供孢子发芽生长用的种子培养基,可添加一些易被吸收利用的碳源和氮源。 3. 种子培养基成分还应考虑与发酵培养基的主要成分相近。 (1)根据产物合成的特点来设计培养。 (2)发酵培养基的各种营养物质的浓度应尽可能高些,这样在同等或相近的转化率条件下有利于提高单位容积发酵罐的利用率,增加经济效益。 (3)发酵培养基需耗用大量原料,因此,原料来源、原材料的质量以及价格等必须予以重视。 发酵培养基 二、发酵培养基选择的依据 根据微生物的特点选择培养基 细菌、酵母菌、霉菌、放线菌四类 根据发酵方式选择培养基 从生产实践和科学试验的不同要求选择 从经济效益方面考虑选择培养基 (1)必须提供合成微生物细胞和发酵产物的基本成分。 (2)有利于减少培养基原料的单耗,即提高单位营养物质所合成产物数量或最大产率。 (3)有利于提高培养基和产物的浓度,以提高单位容积发酵罐的生产能力。 (4)有利于提高产物的合成速度,缩短发酵周期。 (5)尽量减少副产物的形成,便于产物的分离纯化。 (6)原料价格低廉,质量稳定,取材容易。 7)所用原料尽可能减少对发酵过程中通气搅拌的影响,利于提高氧的利用率,降低能耗。 (8)有利于产品的分离纯化,并尽可能减少产生“三废”的物质。 三、发酵培养基的配制原则 根据不同微生物的营养需要 营养成分的恰当比例 渗透压 pH值 氧化还原电位 培养基中的碳氮的比例(C/N)在发酵工业中尤为重要。 如果培养基中氮源过多,会引起微生物生长过于旺盛,而不利于产物的积累;当培养基中的碳源含量不足时,容易引起微生物菌体的衰老和自溶。 氮源不足,则微生物菌体生长过于缓慢。培养基中的碳氮比不仅会影响微生物菌体的生长,同时也会影响到发酵的代谢途径。 不同微生物菌种、不同发酵产物所要求的碳氮比是不同的。即使是同一微生物在不同的发酵阶段,对培养基的碳氮比的要求也是不一样的。 四、培养基成分配比的选择 培养基的组分、配比、缓冲能力、黏度、消毒是否彻底、消毒后营养破坏的程度及原料中杂质的含量都对菌体生长和产物形成有影响。 理论+经验 数学分析方法 正交实验设计,方差分析 第一节、培养基的类型及功能 第二节、工业发酵培养基 第三节、淀粉水解糖的制备 第四节、其他原料 白酒 (chinese spirit)发酵:固体发酵培养基; 果酒(fruit spirit)发酵:fruit juice or fruit sauce 啤酒(beer) 发酵:麦芽汁(wort)液体培养基; 酒精(alcohol)发酵:淀粉糖化醪(starch mash) ; 氨基酸(amino acid)发酵:水解糖液加其他营养成分; 柠檬酸(citric acid)发酵:淀粉液化醪 乳酸(lactic acid)发酵:淀粉糖化醪; 甲烷(methane)发酵:复杂的有机废物发酵; 抗生素(antibiotic)发酵:淀粉糖化醪+豆饼粉+麸皮粉; 碳源:供给菌体生命活动所需的能量和构成菌体细胞以及代谢产物的基础。有糖类、脂肪、某些有机酸等等。 氮源:主要构成菌体细胞物质和代谢产物,即蛋白质、氨基酸等之类的含氮代谢物。可分为有机氮源和无机氮源。功能:构成菌体成分;作为酶的组成分或维持酶的活性;调节渗透压、PH值、氧化还原电位等。 无机盐:铅、镁、硫、磷、钾、钠、氯、锌、钴、锰。 特殊生长因子:其功能是构成辅酶的组成分,促进生命活动的进行。如生物素、硫胺素、肌醇等,但需要量是极少的。 水:体内各种生化作用必须在水溶液中进行。营养物质必须溶解于水中,
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