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第一章?血液学一般检验 一、血液生理概要1、血液由血细胞和血浆组成，血细胞包括红细胞、白细胞和血小板。其中血浆占血液的55%，血细胞占45%。 2、血液在加抗凝剂后分离出来的淡黄色液体称为血浆。血液离体后自然凝固，分离出来的液体称为血清。由于血液在凝血过程中会消耗某些凝血因子，如凝血因子Ⅰ（纤维蛋白原）、Ⅱ（凝血酶原）、Ⅴ、Ⅷ等，故血清中不含这些凝血因子，这是与血浆的主要区别。 3、血液的主要生理功能有：运输功能、协调功能、维护机体内环境稳定、防御功能。 4、血液的主要理化性质 ???（1）血量：正常人的血液总量约为（70±10）ml/Kg体重，成人为4～5升，占体重的6%～8%。 ???（2）颜色：动脉血因氧合血红蛋白（HbO2）含量高而呈鲜红色，静脉血因还原血红蛋白（Hbred）含量高而呈暗红色。严重CO中毒呈樱红色。 ???（3）红细胞的悬浮稳定性是由于红细胞表面的唾液酸带负电荷。 ???（4）黏滞性：黏度主要与HCT和血浆黏度有关。血浆黏度主要与血浆中的纤维蛋白、球蛋白有关，它们浓度越高，血黏度越高。健康成人全血黏度为生理盐水的4～5倍，血浆黏度为生理盐水的1.6倍左右。 ???（5）比密：血液比密男性为1.055～1.063，女性为1.051～1.060；血浆比密为1.025～1.030，血细胞为1.090。 ???（6）渗透压：血浆的渗透压主要为晶体渗透压，与血浆中的晶体物质有关，特别是电解质。正常人血浆渗透压为290～310mOsm（kg·H2O）。 ???（7）pH：正常人血浆pH为7.35～7.45。 二、血液标本的采集、送检、保存与处理1、采血的方法和部位：?皮肤采血一人一针，WHO推荐成人使用左手无名指内侧。婴幼儿选用足跟；静脉采血成人选用肘部静脉（压脉带不捆绑不超过1分钟）。真空采血法是ICSH推荐的采血方法，也是临床常用的采血方法。 ?★手工法做血常规时，采血的顺序依次为血小板、红细胞、血红蛋白、白细胞、血型鉴定。 2、普通采血注意事项：为了避免溶血应注意①注射器和容器必须干燥；②抽血时避免气泡产生；③抽血完毕后拔下针头再把血沿管壁注入容器；④禁止用力震荡试管；⑤血小板功能试验应使用塑料注射器或经硅化处理后的试管；⑥压脉带捆绑不能超过1分钟。 3、溶血对K的影响最大，对酶类影响也大，尤其是LDH。 4、血液标本若不能及时检查，血液应室温保存。虽然4℃可延长血液贮存，但会影响PLT和MPV值。 5、血液标本的抗凝：①血细胞计数用EDTA-K2（不适凝血和血小板功能检查）抗凝，紫盖；②红细胞渗透脆性试验、HCT用肝素（不适凝血检查和白细胞计数）抗凝，绿盖；③凝血因子测定用枸橼酸钠抗凝，比例是1:9，蓝盖。④血沉测定用枸橼酸钠抗凝，比例是1:4，黑盖。⑤血糖测定用氟化钠抗凝，灰盖；⑥血钙用肝素抗凝。⑦双草酸盐抗凝剂由草酸钾和草酸铵按照2:3比例配合而成，前者可使红细胞体积变小，后者反之。 6、血涂片的制备：①一张良好的血涂片应厚薄适宜、头体尾分明、细胞分布均匀、边缘整齐、两侧有一定空隙、血膜占玻片的2/3；②HCT增高，应使用小血滴、小角度、慢推。HCT低时，反之。 三、血细胞染色1、瑞氏染色（Wright）是血涂片最常用的染色方法。 ???（1）瑞氏染液由碱性亚甲蓝，酸性伊红，甲醇（有机溶剂、脱水、固定）组成； ???（2）细胞的着色既有物理吸附作用又有化学亲和作用； ???（3）碱性环境中细胞带负电，与碱性染料亚甲蓝结合偏蓝。酸性性环境中细胞带正电，与酸性染料伊红结合偏红，中性颗粒与伊红和亚甲蓝均可结合，染淡紫红色； ???（4）缓冲液的pH为6.4～6.8，如果缓冲液偏酸（pH＜6.4）则红细胞和嗜酸性粒细胞偏红，白细胞核呈淡蓝色或不着色。如果缓冲液偏碱（pH＞6.8）细胞染呈灰蓝色，颗粒深暗；嗜酸性粒细胞可染成暗褐色，甚至紫黑色或蓝色；中性颗粒偏粗，染成紫黑色。 ???（5）新鲜配置的染液染色效果差，应贮存一段时间，时间越久，染色效果越好，瑞氏染液的成熟指数以RA（A650nm/A525nm）＝1.3±0.1为宜。 2、吉姆萨染色（Giemsa） ???（1）吉姆萨染液组成：天青，伊红，甲醇，纯甘油。 ???（2）染色原理和瑞氏染色原理一样，本法对细胞核和寄生虫着色较好，但对细胞质和颗粒着色较差。 ???（3）瑞氏-吉姆萨复合染色法能使细胞核及细胞颗粒均能获得满意的染色效果。 四、血液常用检查 1、血细胞显微镜计数的误差有技术误差和固有误差，其中技术误差包括①采血部位不当；②稀释倍数不准；③充液不当；④血液发生凝固；⑤误认；⑥仪器不准；⑦气泡产生。固有误差包括计数域误差和仪器误差，比如每次充池后细胞计数池分布不可能完全相同而造成的误差。仪器误差指仪器不精密而造成的误差。 （一）红细胞计数 1、造血干