第四章DNA损伤、修复和突变.pptVIP

PR 1、光复活 ----TT---- ----AA---- ----TT---- ----AA---- ----TT---- ----AA---- ----TT---- ----AA---- 复制前、不容易出错 260~380nm蓝光、PR 酶 (photo-reactivation enzyme) 光敏裂合酶（photolyase） 可见光激活 二、聚体修复的机制 * Photoreactivation (光复活) 在可见光的存在下，DNA光解酶（photolyase，光复活酶）可将 环丁烷二聚体再分解为单体。 这些酶含有可吸收蓝光并将能量转移到待切环丁烷环中的辅基 。E. coli 的光解酶含有2个色素分子，N5，N10-次甲基四氢叶酸和还原性的黄素腺嘌呤二核苷酸（FAD）。 光复活对嘧啶二聚体是专一性的。是损伤被“直接修复”的一种例子，是无差错的。 DNA Repair A B A B C A B C A B C A B 螺旋酶 Pol? 螺旋酶 连接酶 切 补 切 封 无差错直接修复 * 发色团 光复活酶 3. FADH-自由基影响二聚体电子分布，二聚体解开 无差错直接修复 1.光复活酶识别并结合在嘧啶二聚体部位 2. 发色团吸收370nm的可见光，形成FADH-自由基 Photoreactivation of Thymine Dimers DNA紫外线损伤的光裂合酶修复 1、形成嘧啶二聚体 2、光复合酶结合于 损伤部位 3、酶被可见光激活 4、修复后酶被释放 * 烷基转移酶 无差错直接修复 损伤：烷化剂使鸟嘌呤或 O6位甲基化，改变它的配对性质。 修复：烷基转移酶特异性地转移O6 –甲基鸟嘌呤或 O6 –乙基鸟嘌呤上的甲基或乙基基团到酶分子的半胱氨酸上，从而修复DNA损伤。 2、烷基转移修复 3、切除修复 Exision—Repair 复制前进行 不易出错 UvrA, B, C gene 内切核酸酶 （Endonucleases） 外切核酸酶 （Exonuclease） DNA pol Ligase 碱基切除修复 核苷酸切除修复 碱基切除修复 核苷酸切除修复 DNA损害 * Excision repair (切除修复) Including Nucleotide Excision Repair（ NER，核苷酸切除修复）----- E. coli UvrABC endonuclease 系统 Base excision repair (BER，碱基切除修复)--- Uracil-DNA N glycosylase system（糖基化酶系统） Error-free repair无差错修复 DNA Repair * Exision repair (切除修复) .是修复DNA损伤最为普遍的方式。对多种DNA损伤包括碱基脱落形成的无碱基位点、嘧啶二聚体、碱基烷基化、单链断裂等都能起修复作用。 这种修复方式普遍存在于各种生物细胞中，也是人体细胞主要的DNA修复机制。 修复过程需要多种酶的一系列作用，基本步骤如下图 DNA Repair DNA的损伤和切除修复 碱基丢失 碱基缺陷或错配 结构缺陷 切开 核酸内切酶 核酸外切酶 切除 DNA聚合酶 DNA连接酶 AP核酸内切酶 核酸外切酶 切开 修复 连接 糖苷酶 插入酶 碱基取代 切除 单林娜 制作 * 1.uvrA 和uvrB 蛋白识别损伤部位 。 2.发现二聚体后，uvrA解离，uvrC 加入。 3.uvrB和uvrC 复合体在损伤部位的两端造成单链缺口。 4.损伤部位的 DNA 被DNA螺旋酶(uvrD)移走。 核苷酸切除修复—Excision repair systems in E. coli 单林娜 制作 * 5. DNA上的缺口由 DNA 聚合酶 I 和连接酶填补）。 DNA Repair * damage recognition XPC-hHR23, XPA XPB, XPD XPF–ERCC1, XPG unwinding nicking repair synthesis NER in eukaryotes XPA binds the lesion 3’ 5’ 核苷酸切除修复 * DNA聚合酶 DNA连接酶 DNA解旋酶 human excinuclease E.coli excinuclease DNA损伤 Nucleotide excision repair ε ε 人类核酸切除酶 * 切除修复步骤： ①首先由核酸酶识别DNA的损伤位点，在损伤部位的5′侧切开磷酸二酯键。不同的DNA损伤需要不同的特殊核酸内切酶来