Agilent1260高效液相作业指导书.pdfVIP

Agilent1260高效液相作业指导书 1.目的 1.1 规范Agilent1260 高效液相色谱仪的操作，有利于仪器的使用和检测 工作的开展。 1.2 使Agilent1260 高效液相色谱仪处于受控状态，保证检测结果的准确 性和可靠性。 1.3 方便 Agilent1260 高效液相色谱仪的日常维护及常见故障的检查和解 决。 2.范围 本作业指导书适用于Agilent1260液相色谱仪。 3.职责 3.1 检验室负责制定操作规程。 3.2 仪器负责人组织实施操作规程并保证仪器的有效使用。 3.3质量员保证仪器处于受控状态并负责编写仪器的检定、期间核查计划并组 织落实实施 4.操作规程 4.1 开机 打开计算机，登陆windows操作系统。 打开主机各模块电源（从上至下），待各模块完成自检后，再双击桌面“仪器 4.2 联机”图标,进入化学工作站，从“视图”菜单中选择“方法和运行控制” 画面。 把各流动相放入溶剂瓶中。 旋开排气阀（逆时针），右单击“四元泵”图标出现快捷键，点击“方法”选 项进入泵编辑画面。将泵流量设到3ml/min，溶剂A设到100%，打开泵，排出管 线中的气体2—3分钟，直到管线内由溶剂瓶到泵入口无气泡为止,查看柱前压力 （若大于10bar，则应更换排气阀内过滤白头）。 依此切换到B、C、D溶剂分别排气。 将泵的流量设到0.8ml/min，多元泵则再设定溶剂配比，如A=80%，B=20%；关 闭排气阀（顺时针）。 再将泵的流量设到 0.8ml/min，2 分钟后将泵的流量设到 1.0ml/min，冲洗色 谱柱20—30分钟。 把缓冲液换成流动相，待柱前压力基本稳定后,打开检测器灯，观察基线情况。 4.3 数据采集方法编辑 编辑样品信息：由“运行控制”进入“样品信息”，设定操作者姓名，样品数 据文件名等。 编辑完整方法：从“方法”菜单中选择“编辑完整方法”项.选中项单击“确 定”入下一画面“方法注释”，编辑好单击“确定”进入下一画面“选择进样源”， 选中Als单击“确定”入下一画面“设置方法”进行参数设定。 四元泵参数设定：在“流速”处输入流量,如1ml/min,在“溶剂”处选中B输 入 18%(A=100-B-C-D)，在右面注释栏中标明各溶剂的名称；设置“停止时间” 和“后运行时间”，在“压力限值”处输入柱子的最大耐高压以保护柱子如：400ba ， 在“时间表”添加编辑梯度。 进样器参数设定：在进样模式中输入进样量 xxul。“标准进针”——只能输 入进样体积此方式无洗针功能。“针清洗后进样”——可以输入进样体积和洗瓶 位置为xx，此方式针从样品瓶抽完样品后会在洗瓶中洗针。 进样器进样程序参数设定：选中使用进样程序，在“函数”中添加相应函数即 可按程序进样。 TCC检测器参数设定：在“温度”左侧下面的方框内输入所需温度,并选中它, 右侧选中“与左侧相同” ——使柱温箱的温度左右一致。 VWD检测器参数设定：在“波长”下方的空白处输入所需的检测波长,如214nm, 在 “峰宽(响应时间)”下方点击下拉式三角框,选择合适的响应时 间, 如0.1min(2s),再设置“停止时间”和“后运行时间”。 仪器曲线设置：默认即可。 4.4数据处理 从“视图”菜单中单击“数据分析”进入数据分析画面 从“文件”菜单选择“调用信号”选中您的数据文件名，单击“确定”。 谱图优化,从“图形”菜单中选择“信号选项”从“范围”中选择“自动量程” 及合适的显示时间单击“确定”,或选择“自定义量程”调整,反复进行直到图的 比例合适为止。 积分:从“积分”中选择“自动积分”,积分结果不理想,再从菜单中选“积分 事件”，选项选择合适的“斜率灵敏度,峰宽,最小峰面积,最小峰高”.从“积分” 菜单中选择“积分”选项则数据被积分.如积分结果不理想则修改相应的积分参 数直到满意为止。单击左边图标将积分参数存入方法。 校正表设计：点击“校正”菜单中的“校正设置”，给出各个参数：点击“确 定”；调出建立校正表所需的谱图并对谱图进行图形优化和积分优化；点击“校 正”菜单中的“新建校正表；在“新建校正表”栏里选定“自动设定”点击“确 定”；在“校正表”中给出正确的“化合物名”和“含量”；如需增加校正点数， 给出第二校正点的“含量”，校正表建立完成后点击“确定”，点击“保存图标” 将校正表存入方法中。 打印报告:从“报告”菜单中选择“设定报告”选项进入画面