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- 2022-03-25 发布于内蒙古
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大量提取质粒DNA CsCl密度梯度离心法
大量提取质粒dnacscl密度梯度离心法
提取大量质粒DNA LPAR;CSCL密度梯度离心;
大量提取质粒dna(cscl密度梯度离心法)来源:2021-6-9访问量:3520
质粒DNA的大规模提取(CSCL密度梯度离心)2022-7-7
大量提取质粒dna(cscl密度梯度离心法)
1.预约振动台和超速离心机。
2.配tb培养基(1l锥形瓶中装250ml培养液),并灭菌。质粒做好转化,并涂板。
3.第一天早上,在TB中添加适量的amp或kana。挑取细菌,在37℃的摇床中培养24小时至OD600至10-15。
4.检查以下药品:25%sucrosein50mmtris-hcl(ph8.0)250ml、lysozyme粉末1g、0.5medta
ph8.050ml、rnasea(100mg/ml)150ul、triton-lysis100ml、peg8000300ml、1×te150ml、
cscl250g、正丁醇2瓶、eb2ml。
5.第二天早上,将细菌溶液倒入离心瓶中,用beckmanj6 mi离心机以4200rpm的转速离心20min。离心后,放入
上清倒干。在离心的时候,配lysozyme25ml。并将rnase置于室温。
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