生物化学蛋白质的生物合成.pptxVIP

蛋白质的生物合成 Protein Biosynthesis，Translation 翻译是蛋白质生物合成的同义词 翻译的过程就是将核酸中由4种碱基序列组成的遗传信息，通过遗传密码破译的方式转变成为蛋白质中的20种氨基酸排列顺序。第一节 蛋白质生物合成体系参与蛋白质生物合成的物质包括： 三种RNAmRNA（messenger RNA, 信使RNA）rRNA（ribosomal RNA, 核蛋白体RNA）tRNA（transfer RNA, 转移RNA） 20种氨基酸（AA）作为原料 酶及众多蛋白因子，如IF、eIF ATP、GTP、无机离子1、翻译模板mRNA及遗传密码mRNA是遗传信息的携带者mRNA的结构决定蛋白质的结构mRNA核苷酸顺序决定蛋白质分子中的氨基酸顺序2、核糖体或称核蛋白体，蛋白质合成的场所在真核细胞中，有的游离存在于细胞浆内，有的附着于内质网上核蛋白体的组成肽键形成的催化中心位于大亚基上在起始阶段mRNA的专一性结合发生在小亚基上核糖体的基本功能（1）识别mRNA上的起始位点并开始翻译（2）密码子与tRNA上的反密码子正确配对（3）合成肽键原核生物翻译过程中核蛋白体结构模式:P位：肽酰位(peptidyl site)A位：氨基酰位(aminoacyl site)E位：排出位(exit site)大小亚基上存在的主要功能小亚基上有：mRNA结合位点 延伸因子EF-Tu结合位点 肽酰tRNA结合位点 起始因子结合位点大亚基上有：氨酰tRNA结合位点 延伸因子EF-G结合位点 肽酰转移酶位点 E位点 L7/L12蛋白 （是许多可溶性蛋白因子出入核糖体的门户）3、tRNA与氨基酰tRNA（1）tRNA的二级结构A C C氨基酸臂反密码环（2）tRNA的三级结构示意图 tRNA分子的反密码环与mRNA上的密码配对。 tRNA的3’-末端-CCA-OH是氨基酸的结合位点。 由密码 — 反密码 - 氨基酸之间的“对号入座”，保证了从核酸到蛋白质信息传递的准确性。氨基酰tRNA的表示方法氨基酰-tRNA书写规则：aa-tRNAaa；Arg-tRNAArg；原核生物：起始密码（AUG、GUG、UUG） —— 编码N-甲酰甲硫氨酸 fMet、tRNAfMet， fMet-tRNAfMet；真核生物：起始密码（AUG） —— 编码甲硫氨酸 Met、Met-tRNAiMet； 翻译过程：密码（AUG） —— 编码甲硫氨酸 Met、Met-tRNAeMet。（3） 氨基酸的活化氨基酰-tRNA合成酶氨基酸 + tRNA氨基酰- tRNAATP AMP＋PPi氨基酰-tRNA合成酶(aminoacyl-tRNA synthetase)第一步反应氨基酸 ＋ATP-E —→ 氨基酰-AMP-E ＋ PPi 第二步反应氨基酰-AMP-E ＋ tRNA ↓ 氨基酰-tRNA ＋ AMP ＋ E中间为U的氨基酸，主要连于tRNA3’端A的2’位上，中间为C的氨基酸，主要连于3’位上。氨基酰tRNA合成酶氨基酰-tRNA合成酶对底物氨基酸和tRNA都有高度特异性。氨基酰-tRNA合成酶具有校正活性(proofreading activity) 。4、遗传密码 mRNA分子上从5?至3?方向，由AUG开始，每3个核苷酸为一组，决定肽链上某一个氨基酸或蛋白质合成的起始、终止信号，称为三联体密码（triplet code） 起始密码（initiation coden）: AUG 终止密码: UAA，UAG，UGA （termination coden）遗传密码表从mRNA 5?端起始密码子AUG到3?端终止密码子之间的核苷酸序列，各个三联体密码连续排列编码一个蛋白质多肽链，称为开放阅读框架(open reading frame, ORF)。 遗传密码的特点 1．不重叠 每个三联体密码独立的代表一种AA，沿5′→3′方向逐个阅读核苷酸。2．密码子通用性和变异性◆ 各种生物共用同一套遗传密码，从细菌到人都适用。 不同生物中不同密码的使用频率不同。◆ 通用性不是绝对的。 如：人线粒体的密码与通用的遗传密码不完全相同。 UGA不再是终止密码 → 色AA的密码◆ 结论：遗传密码并非完全通用，而是近于完全通用。 3、简并性（Degeneracy） 遗传密码中，除色氨酸（UGG）和甲硫氨酸（AUG）仅有一个密码子外，其余氨基酸有2、3、4个或多至6个三联体为其编码。这称为遗传密码的简并性。 编码同一氨基酸的几组简并密码子上第一、二位 碱基多数相同，而第三位碱基改变不影响氨基酸翻译。4．无间隔性——连续性 密码子之间是连续的，无其它核苷酸隔开。密码子被识别阅读时，从起始密码子开始，直到终止密码子为止。 密码中插入或减去一个碱基会使后面的密码发