酶学三重要酶类及其活性调.pptxVIP

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1;(二)酶的别构调控;(1)常为多个亚基构成的寡聚体; (2)具有别构效应; (3)动力学曲线不符合米氏方程双曲线; (4)酶分子上含两个中心或部位:活性中心 (活性部位)和别构中心(别构部位)。 注:变构中心不是酶活性中心的组成部分。;酶的别构(变构)效应示意图;(1)调节物:也称效应物,对酶分子具有别构调节作用的化合物。一般是酶的底物或底物类似物或代谢的终产物。结合在酶的别构中心,负责调节酶促反应的速度。 (2)正效应物:指效应物的结合使酶活性升高,也称别构激活剂。 (3)负效应物: 指效应物的结合使酶活性降低,也称别构抑制剂。 ;同促效应:配体相同,当一个效应物与酶结合后,影响另一相同的效应物与酶的另一部位结合。 异促效应:配体不同,当一个效应物与酶结合后,影响另一不同效应物与酶另一部分结合。; 正协同效应:指效应物分子与变构酶结合后,本身构象发生变化,有利于后续底物分子或调节物分子的结合。 负协同效应:指效应物分子与变构酶的结合后,本身构象发生变化,不利于后续底物分子或调节物分子的结合。;正、负协同效应别构酶与米氏酶动力学比较 ;别构酶调节的两种模型;齐变模型(MWC): 1965年由Monod、Wyman和Changeux提出。 ;(三)可逆的共价修饰调节;第13页/共48页;第14页/共48页;(四)酶原及酶原激活;酶原激活的机理;赖; 酶原激活的生理意义;切赫(Cech);随后的研究表明: L19RNA具备酶促催化的几个特征: 高度的底物专一性 遵循Michaelis-Menten动力学 对竞争性抑制剂的敏感性; (2) 1992年,Piccirilli等发现L19RNA具有氨酰酯酶的活性,催化氨酰酯水解。 (3) L19RNA还有限制性内切酶作用: -CpUpCpUpN- + G -CpUpCpU +GpN ; (4) 1997年,Zhang和Cech用人造的RNA分子催化合成了肽链,表明RNA具有肽基转移酶活性。 (5) 原核生物RNaseP和 兔肌1,4- ?-葡聚糖分枝酶;核酶的发现与研究证明RNA也可以是酶,即酶不都是蛋白质,而且有重要的理论与实践意义。 核酶的发现证明了RNA既能够携带遗传信息,又具有生物催化功能。 对核酶结构和作用机制的研究可帮助人们设计生物体内本不存在的酶,作为工具去催化特定的反应。;RNA既能携带遗传信息 又有生物催化功能。 ——RNA可能早于蛋白质和DNA, 是生命起源中首先出现的生物大分子 切割癌基因、致病病毒基因;九、核酶、抗体酶与同工酶;(三)同工酶;H;乳酸脱氢酶同工酶形成示意图; 存在于同一个体的不同组织中,也存在于同一组织、同一细胞的不同亚细胞结构中,甚至存在于不同发育时期的组织中。 是细胞分化及形态遗传的分子学基础研究的有力工具; 在代谢调控中也起重要作用; 作为疾病诊断的指标。如乳酸脱氢酶(LDH);乳酸脱氢酶同工酶电泳图谱;LDH同工酶谱分析的临床意义:;(一)酶分离纯化的一般原则—与蛋白质相似;1、酶活力(enzyme activity, 也称酶活性) ;酶活力单位的表示方法;3、酶的比活力(specific activity,也称比活性) ;4、测定酶活力时应注意几点 ;5、测定酶活力的一般方法;(1)分光光度法(spectrophotometry) ;(2)荧光法(fluorometry)——放射测量法 ;(3)酶偶联分析法(enzyme coupling assay) ; 酶的纯度鉴定: 聚丙烯酰胺凝胶电泳法 等电聚焦电泳法; ;三、酶工程;2、生物酶工程:;酶与某些疾病发生的关系; 皮肤乳白色,毛发淡黄或银白色,瞳孔淡红,虹膜淡灰或淡红,半透明视网膜缺乏色素。;智力低下,60%患儿有脑电图异常,头发细黄,皮肤色淡和虹膜淡黄色,惊厥,尿有“发霉”臭味或鼠尿味。;胱硫醚合成酶缺陷——同型胱氨酸尿症;感谢您的观看!

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