的粗提取和鉴定.pptxVIP

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实验二十 DNA的粗提取和鉴定;三、实验步骤 (1)制备鸡血细胞液:(实验室备好) (2)提取细胞核物质: (3)溶解DNA: (4)析出含DNA的黏稠物: (5)滤取含DNA的黏稠物: (6)DNA的黏稠物再溶解: (7)过滤含DNA的氯化钠溶液 ;(8)提取较纯净的DNA:;[重点问题] (1)使用蒸馏水“2”次(第一次:加到鸡血细胞液中,使血细胞吸水膨胀、破裂;第二次:加到含DNA的2 mol/LNaCl溶液中,使DNA析出) (2)使用纱布进行“3”次过滤 第一次:过滤血细胞液,提取细胞核中的物质(取滤液,单层) 第二次:滤取0.1mol/LNaCl溶液中析出 DNA(取黏稠物,多层) 第三次:过滤溶有DNA的2mol/LNaCl溶液 (取滤液,2层);[重点问题] (3)使用NaCl溶液“4”次 第一次:加2mol/LNaCl溶液,溶解提取的细胞核物质 第二次:(加蒸馏水)0.14mol/LNaCl溶液,使DNA析出 第三次:加2mol/LNaCl溶液,溶解滤取的DNA黏稠物 第四次:加0.015mol/LNaCl溶液,鉴定DNA (4)实验中“6”次搅拌 前5次搅拌要求朝向是一个方向,且在析出DNA,DNA再溶解提取各步中“轻缓”,玻璃棒不要直接插烧杯底部,防止DNA分子断裂 整个实验过程中,使用的烧杯、试管都是塑料的——因DNA易吸附在玻璃容器上,减少DNA损失

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