组胚研讨干细胞移植治疗糖尿病进展.pptVIP

* 干细胞stem cell 未分化细胞 自我更新 (self-renew) 无限增殖 体外长期培养 多向分化潜能 (multipotential) 当前1页，共21页，星期日。 * 干细胞的类型： 胚胎干细胞 embryonic stem cells 胚胎干细胞主要是指来自囊胚内细胞团的细胞，有自我更新和多向分化潜能，可以分化为内、中、外三个胚层的各类细胞。 成体干细胞 adult stem cells 成体干细胞是处于干细胞状态的成体细胞，包括成年和未成年动物组织中的各种干细胞，因此又称为组织干细胞。如神经干细胞、 造血干细胞 、 骨髓间质干细胞、上皮干细胞 、肝干细胞、胰腺干细胞等。 当前2页，共21页，星期日。 胚胎干细胞ES细胞 ES 细胞是目前研究最广泛、最成熟的干细胞体系。自 2009 年起，全球共批准了 3项人 ES（hES）细胞的临床试验，标志着 hES 细胞向临床应用迈出了重要的一步。然而，hES 细胞.临床应用面临的一个瓶颈问题是免疫排斥反应。体细胞核移植（SCNT）技术能够制备携带患者基因型的 hES 细胞，可解决免疫排斥的难题。2013 年，美国 Mitalipov 研究团队将人类皮肤成纤维细胞核移植到供体去核卵细胞中，成功建立了 SCNT 的hES 细胞，标志着治疗性克隆又向前迈出关键性的一步。然而，hES 细胞建系必须摧毁人类早期胚胎，故存在剧烈的伦理学争议。此外，hES 细胞来源的分化细胞移植到体内存在发展为肿瘤的潜在风险。 当前3页，共21页，星期日。 诱导多能干细胞iPS 细胞 iPS干细胞建立的简单过程 iPS干细胞建立的过程主要包括： （1）分离和培养宿主细胞； （2）通过病毒介导或者其他的方式将若干多个多能性相关的基因导入宿主细胞； （3）将病毒感染后的细胞种植于饲养层细胞上，并于ES细胞专用培养体系中培养，同时在培养中根据需要加入相应的小分子物质以促进重编程； （4）出现ES样克隆后进行iPS干细胞的鉴定（细胞形态、表观遗传学、体外分化潜能等方面）。 （5）非致死性外界刺激（如物理压缩，去除细胞膜上细菌毒素等， 当前4页，共21页，星期日。 诱导多能干细胞iPS 细胞 采用体细胞重编程技术可从患者自体细胞获得的 iPS 细胞，这不但可解决免疫排斥的难题，而且避免了 hES 细胞和 SCNT 研究存在的伦理学争论。 当前5页，共21页，星期日。 糖尿病发病机制 当前6页，共21页，星期日。 干细胞治疗机制 疾病发病机制 干细胞治疗机制 结构改变 内环境变化 细胞/组织破坏 缺乏血供; 免疫功能紊乱; 缺乏生长与营养因子；自由基; 提供外源性干细胞； 刺激内源性干细胞； 分化－结构重建 促进血管再生； 调节免疫功能； 分泌生长与营养因子； 清除自由基； 干细胞治疗糖尿病机制 当前7页，共21页，星期日。 干细胞治疗糖尿病机制 干细胞对胰岛β细胞的修复 干细胞对其他胰岛素分泌细胞的修复 干细胞对胰岛素抵抗的作用 当前8页，共21页，星期日。 目前应用的干细胞 根据来源的不同，干细胞可分为胚胎干（ES）细胞、诱导性多潜能干（iPS）细胞及成体干细胞。 不同种类的干细胞具有各自的优势和不足。 当前9页，共21页，星期日。 *  I 型糖尿病的治疗 外源胰岛素治疗 胰腺或胰岛移植 干细胞治疗： 胚胎干细胞 诱导分化成 β 细胞 细胞移植 基因导入使其表达胰岛素 细胞移植 胰腺干细胞 诱导分化成 β 细胞 细胞移植 当前10页，共21页，星期日。 * 胰腺干细胞的标志 1990年，Lendahl 等人发现神经干细胞中存在一种新的中间丝蛋白—巢蛋白（nestin），现在 nestin已是公认的神经干细胞标志之一。 2000年，Hunziker 和 Stein 发现胰腺导管和胰岛中也存在 nestin阳性细胞。  2001年， Zulewski等人从胰腺中分离到nestin阳性细胞，将其命名为NIPs（ nestin-positive islet-derived progenitor cells ），并发现具有多向分化潜能 ( multipotential )，在体外可自发形成类胰岛细胞团（ islet-like cell clusters , ICCs）.  因此，人们相信nestin可能也是胰腺干细胞的标志。但是，NIPs是否确实是胰腺干细胞，能否用于细胞治疗必须进一步证实。