第十 第十一章吸光光度分析法.pptVIP

练习 解： 2．精密称取0.0500g样品，置于250mL容量瓶中，加入 0.02mol/L HCL溶解，稀释至刻度。准确吸取2mL，稀释至 100mL。以0.02mol/L HCL为空白,在263nm处用1cm吸收池 测定透光率为41.7%，其摩尔吸光系数为12000，被测物分 子量为100.0，试计算263nm处 和样品的百分含量。 11.6 光度分析法的误差11.6.1 偏离Beer定律的因素 依据Beer定律，A与C关系应为经过原点的直线 偏离Beer定律的主要因素表现为以下两个方面 1. 光学因素 2. 化学因素 1.光学因素 1) 非单色光的影响 Beer定律应用的重要前提——入射光为单色光 照射物质的光经单色器分光后并非真正单色光 其波长宽度由入射狭缝的宽度和棱镜或光栅的分辨率决定 为了保证透过光对检测器的响应，必须保证一定的狭缝宽度 这就使分离出来的光具一定的谱带宽度 续前 讨论： 入射光的谱带宽度严重影响吸光系数和吸收光谱形状 结论： 选择较纯单色光（Δλ↓，单色性↑） 选λmax作为测定波长（Δ?↓，S↑且成线性） 2)反射光和杂散光的影响 杂散光是指从单色器分出的光不在入射光谱带宽度范围内，与所选波长相距较远 杂散光来源：仪器本身缺陷；光学元件污染造成 反射光和杂散光均是入射光谱带宽度内的光 直接对T产生影响 散射和反射使T↓，A↑，吸收光谱变形 注：一般可用空白对比校正消除 I0 I 3) 非平行光的影响 使光程↑，A↑，吸收光谱变形 2. 化学因素 化学作用 Beer定律适用的另一个前提：稀溶液 浓度过高会使c与A关系偏离定律 1) 生色团（发色团） O －N＝N－，－N＝O， O C=S,－N （共轭双键）πe 能吸收紫外-可见光的基团 有机化合物：具有不饱和键和未成对电子的基团产生n→ π*跃迁和π→ π*跃迁, 跃迁E较低 注：当出现几个发色团共轭，则几个发色团所产生的吸收带将消失，代之出现新的共轭吸收带，其波长将比单个发色团的吸收波长长，强度也增强 2) 助色团 本身无紫外吸收，但可以使生色团吸收峰加强同时使吸收峰长移的基团 有机物：连有杂原子的饱和基团 例：—OH，—OR，—NH—，—NR2—，—X 3) 红移和蓝移 由于化合物结构变化（共轭、引入助色团取代基）或采用不同溶剂后，吸收峰位置向长波方向的移动，叫红移(Bathochromic shift); 吸收峰位置向短波方向移动，叫蓝移(Hyptochromic sfift). 4) 增色效应和减色效应 增色效应：吸收强度增强的效应 减色效应：吸收强度减小的效应 5) 强带和弱带 εmax105 → 强带(Strong band) εmin103 → 弱带(Weak band) 有机显色剂 CH3－C－C－CH3 HO－N N－OH ＝ ＝ N N OH COOH SO 3 H OO型： N N N O H OH ON型： PAR N H N H N S N S型： 双硫腙 NN型： 丁二酮肟 邻二氮菲 磺基水杨酸 显色条件的选择 cR cR cR 1. 显色剂用量(cM、pH一定) Mo(SCN)32+ 浅红 Mo(SCN)5 橙红 Mo(SCN)6- 浅红 Fe(SCN)n3-n 2. 显色反应酸度（cM、 cR一定） pH1pHpH2 pH 邻二氮菲－亚铁反应完全度与pH的关系 Fe2++3R H＋ H＋ A 柠檬酸 cR≈[R′]=10-4mol·L-1 β3＝1021.3 β3 FeR3 酸度的影响 pH3.5～5.7为适宜的酸度范围 3. 显色温度及显色时间 另外，还有介质条件、有机溶剂、表面活性剂等 T1(℃) T2(℃) t(min) A 4.干扰及消除 化学法 Co2＋, Fe3+ Co2+ FeF63- Co(SCN)2 (蓝) ⑴NaF SCN－ Co2+ Fe2+,Sn4+ (2)Sn2+ Co(SCN)2 SCN－ 测Co2＋(含Fe3+) 掩蔽法 氧化还原法 测Co2＋ (生成络合物性质不同) Co2+, Zn2+, Ni2+, Fe2+ CoR,ZnR NiR,FeR CoR, Zn2+ , Ni2+ , Fe2+ 钴试剂R H+ 如不能通过控制酸度和掩蔽的办法消除干扰，则需采取分离法。 测Fe3＋(控制pH) Fe3+, Cu2+ FeSS （紫红） Cu2+ pH 2.5 SS 磺基水杨酸 测量条件的选择 1.