分子生物学研究法上.ppt

整理ppt 5?RACE 在反转录酶的作用下，以已知基因片段内部特异性引物(GPS1)启始cDNA第一条链的合成 RNase降解模板mRNA，纯化cDNA第一条链。 用末端转移酶在cDNA链3?端加dC，形成寡聚(dC)尾巴。 以连有寡聚(dG)的锚定引物(AP)和基因片段内部特异引物(GPS2)进行PCR扩增，以期得到目的基因5?端片段。 3?RACE 在反转录酶的作用下，以连有可以和polyA配对的寡聚(dT)的锚定引物启始cDNA第一条链的合成。 RNaseH降解模板mRNA。 用通用锚定引物和基因片段内部特异引物进行PCR扩增，以期得到目的基因3?端片段。 整理ppt 整理ppt 第5章 分子生物学研究法(上)——DNA、RNA及蛋白质操作技术 5.1 重组DNA技术史话 5.2 DNA基本操作技术 5.3 RNA基本操作技术 5.4 基因克隆技术 5.5 蛋白质与蛋白质组学技术 从20世纪中叶开始，分子生物学研究得到高速发展，主要原因是研究方法，特别是基因操作和基因工程技术的进步。 基因操作主要包括DNA分子的切割与连接、核酸分子杂交、凝胶电泳、细胞转化、核酸序列分析以及基因人工合成、定点突变和PCR扩增等，是分子生物学研究的核心技术。 基因工程是指在体外将核酸分子插入载体分子，构成遗传物质的新组合，使之进入原先没有这