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《多糖提取（Sevag 法去蛋白）》
1、实验原理介绍：
Sevag 法是去除游离蛋白的有效方法。在粗多糖溶液中加入氯仿—正丁醇混
合溶液进行充分振摇,将游离蛋白变性成为不溶性物质,经离心分离去除,可达到去
除的目的。
2、实验方法及步骤
具体操作可以按下述操作试一试：取粗多糖溶液4 ml ,氯仿—正丁醇(预先配
制成体积比为4 ∶1 混合液)溶液1ml,置于具塞试管中,充分振摇30min 后,经离心
机离心1min,然后将水相与氯仿相分开。将水相再加入相当于其体积的氯仿—正
丁醇溶液,重复上述过程,共计重复三次。多糖溶液体积较大时也可以采用分液漏
斗，人工进行剧烈振荡后直接分离，注意振荡强度与分离效率关系很大。操作
过程中蛋白质多出现在两相界面处。
3、实验结果及讨论
1、需要取上清液重复加 sevage 试剂我重复了十一次每次振摇15 分在紫
外测250－280 没有吸收峰才可确定除净了蛋白。
2、Sevag 法较为温和，对多糖的结构影响不大，但效率较低，往往重复五
次以上才能达到理想效果。考虑较为剧烈但效率更高的三氯乙酸法除蛋白。
3、糖蛋白不是那么容易除干净的，通常大量取多糖溶液(5%)按，用三角瓶
在摇床上摇2h 再放离心管里离心，得到水层再重复,如果蛋白含量多的话, 除一
两个星期的.直到震荡后水层上不再有白色泡茉为止。
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