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很好，需要好好研究一下 原文地址：毕赤酵母表达知识 01 转载于丁香作者：思时尔非 a.配制 500×BIOTIN stock solution（0.02％）有这么3 种方案： 1、懒人是将Biotin 直接溶在去离子水中，放过夜，基本就能溶； 2、急性子是将溶液配成 0.02N 的NaOH，就很容易溶解了； 3、水浴加热，温度不能高于 50 度。 D－生物素是具有生物活性的生物素，也就是vitaminH。 在毕赤酵母代谢过程中，作为多种酶的辅基起作用。天然培养基中一般可以不单 独添加，因 YNB 中、酵母粉、蛋白胨中均含有一定量的生物素，但是做高密度 发酵还是必须要添加的。 b.有几个比较迷惑的问题请教大家： (很典型的小问题） 1、制感受态细胞，OD 多少比较好？ pyrimidine 战友的方法：取 1mlGS115 过夜培养物 (OD约 6-10) 分装到 1.5mlEP 管中。 说明书还有一些文献是说在 1.3 左右效率高，再高了效率会很低 2、关于高效转化法，文献说用 (LiAc)，而 invitrogen 的说明书说转化毕赤酵母 用 (LiAc)没用，要用 LiCl。 Lithium acetate does not work with Pichia pastoris. Use only lithium chlor