临床免疫检验：组织配型及配型方法.pptxVIP

组织配型及配型方法 前言 供受者之间组织相容性程度越高，移植物存活的几率就越大，所以移植前组织配型非常重要。供者移植物能否在受者体内正常存活， 很大程度取决于供受者间组织配型的正确性 组织配型 血清学分型 细胞学分型 基因分型 组织配型 HLA分型 红细胞血型抗原 交叉配型 用血清学方法检测的HLA抗原称为SD抗原 包括HLA-A、B、C、DR、DQ HLA血清学分型技术 SD抗原 分型方法 补体依赖的细胞毒（CDC）试验 流式细胞仪分析技术 混合淋巴 细胞培养 检测淋巴细胞反应强度 淋巴细胞 分化增殖 确定HLA 基因型别 HLA细胞学分型技术 用细胞学方法检测的HLA抗原称为LD抗原 包括HLA-D、DP LD抗原 LD抗原 混合淋巴细胞培养(MLC) HLA基因分型技术 HLA基因分型技术 RFLP:限制性片段长度多态性分析 PCR-SSOP：序列特异性寡核苷酸探针-PCR PCR-SSP：序列特异性引物-PCR PCR-SSCP：单链构象特异性-PCR SBT分型法：基于序列的HLA分型法 多荧光微珠免疫分析 基因芯片 对HLA基因 进行酶切 电泳分离 转膜 杂交 确定HLA基因型别 对HLA基因进行扩增 转膜 杂交 确定HLA基因型别 HLA基因分型技术 限制性片段长度多态性分析（RFLP） 序列特异性寡核苷酸探针-PCR（PCR-SSOP） 设计特异 性引物 基因DNA 提取 扩增 电泳 确定HLA基因型别 扩增靶序列 变性为两条单链 电泳 确定HLA基因型别 HLA基因分型技术 序列特异性引物-PCR（PCR-SSP） 单链构象特异性-PCR（PCR-SSCP） 扩增 纯化 扩增产物 测序 比对 确定HLA基因型别 将特异性引物标记生物素 扩增 杂交 确定HLA基因型别 磁珠包被 流式细胞仪 HLA基因分型技术 基于序列的HLA分型法（SBT分型法） 多荧光微珠免疫分析 确定HLA基因型别 HLA基因分型技术 基因芯片 扩增 标记扩增产物 杂交 红细胞血型抗原 ABO血型必须相同或相容 交叉配型 淋巴细胞交叉配型 流式细胞术 自身交叉配型 分为外周血淋巴细胞交叉配型、T淋巴细胞毒性交叉配型、B淋巴细胞毒性交叉配型、常采用的检测方法是补体依赖的细胞毒试验（CDC) 将供者淋巴细胞与受者血清共育，再加入荧光素标记的抗人IgG/IgM，用流式细胞仪进行检测 应用受者自身的血清和细胞进行细胞毒试验，检查是否存在自身抗体 01 02 03 小 结 思考题 C 除了上面介绍的组织配型方法外，有些受者体内存在抗HLA抗 体，又称群体反应性抗体（PRA）,可通过输血、输血小板、多 次妊娠、器官移植等途径获得，受者体内PRA水平的高低可判 断器官移植时受者的致敏状态，用于估计移植的可能性。   1.试述PRA检测方法有哪些？ 2.目前在组织配型方面提出了哪些新方法、新技术、新观点、新理论？ 感谢观看