海洋病毒课件.pptVIP

四、海洋病毒的综合利用 赤潮治理 有害细菌控制 有害病原竞争性防治 功能基因资源的开发 新的基因操作载体 新的 生态学技术 * 学习交流PPT 五、海洋病毒生态学关键技术 1、病毒分离浓缩和形态学鉴定技术 （1）吸附洗脱的方法：膜吸附过滤、盐沉淀、吸附剂吸附等是常用的方法。膜吸附过滤-洗脱法被认为是比较好的病毒浓缩技术。 （2）基于病毒的物理学特征：超速离心或透析 2、病毒分子生物学鉴定 主要有两种检测方法: (1) 核酸杂交检测病毒核酸,利用核酸探针、基因芯片检测病毒核酸。(2) 聚合酶链式反应( PCR) 检测病毒核酸。 主要有两种基因分析方法：(1) 对病毒核酸的克隆或PCR产物做限制性酶切片段长度多态性分析(RFL P)。(2) 克隆或PCR 产物核酸序列分 析,产物直接做核酸序列测定,与已公布的序列作比对,分析核酸基因型和基因多态性。 * 学习交流PPT 3、病毒的定量测定 在海洋病毒的定量研究方面,主要有噬菌斑计数法( PFU) 、透射电镜技术( TEM) 、表面荧光显微技术( EIPFM) 和流式细胞计数仪计数( FCM) 等方法。 * 学习交流PPT 六、研究需求与展望 重点海区病毒分布、丰度、种类 病毒分离物资源库和病毒基因库 海洋病毒选择性生态分析技术 海洋病毒基因芯片分析技术 动态的病毒资源数据库 病毒与各种海洋生物相互作用关系 海洋生态和养殖生物疾病动态预报 治理赤潮与海洋污染 海洋生物多样性与生态平衡调节 近期 远期 * 学习交流PPT 7 研究实例1 淋巴囊肿病 淋巴囊肿病(Lymphocystis disease ,LCD) 是由虹彩病毒科淋巴囊肿病毒属的病毒感染而致的一种病毒病。该病侵染宿主范围广，已知至少42 科125 种以上的鱼可被该病毒感染。 淋巴囊肿病是发现最早的鱼类病毒性疾病之一，鲈形目、鲽形目和钝形目中的一些种类都可感染。鲈鱼、真鲷、红斑笛鲷、石斑鱼、牙鲆、大菱鲆和东方纯等都曾发现过。 1998 年,该病在我国北方养殖牙鲆中大规模爆发，给养殖者造成了严重经济损失。 * 学习交流PPT 被淋巴囊肿病毒感染、并表现典型病症的牙鲆。 * 学习交流PPT 图１ 示体表、鳍小疱状肿胀物? 图２示鳍膜上肿状物 * 学习交流PPT 被淋巴囊肿病毒感染、并表现典型病症的鲈鱼。 * 学习交流PPT 7.1 淋巴囊肿病的介绍 淋巴囊肿病是1874年发现的，当时认为是原虫引起的。1962年发现病毒粒子，1966年从鱼类成纤维细胞中分离出病原性病毒而得到证实。 该病毒是网箱或工厂化养鱼的常见病，主要见于1龄鱼类，体长20-30cm，体重100-160g。 病原:淋巴囊肿病毒粒子为正二十面体，大者200-250nm，小的130-150nm。可引起细胞病变，产生细胞质包涵体。 * 学习交流PPT 7.2 淋巴囊肿病的组织学特征 牙鲆淋巴囊肿病毒中国分离株(lymphocystis disease virus isolated from China, LCDV-C) 体外感染的显微图片。显示LCDV-C 可在草鱼细胞(GCO)中增殖，并形成病变斑。(A)正常GCO对照细胞。 (B) LCDV-C接种1天后，GCO细胞的变化。 ? LCDV-C接种了3天后，在单层GCO细胞中形成的病变斑。 * 学习交流PPT 7.3 淋巴囊肿病的细胞学特征 LCDV-C感染GCO细胞的电镜照片。(A)显示细胞中染色体固缩、形成空泡。(B) 主要显示核碎裂。 * 学习交流PPT LCDV-C在GCO细胞中引起病变的显微照片。A、C、E为正常对照细胞；A、B由 Giemsa染色(100)，C、D、E和F由Hoechest 33258 染色(200)； A、B、C、D为普通光镜观察， E、F为荧光显微镜观察。 * 学习交流PPT 7.4 淋巴囊肿病的病状和诊断 病理学特征:在鱼的体表和鳍上出现大小不一、呈白色、灰色、粉红色的乳头状的肿瘤状物，这些肿胀物有各个分散的，也有聚集成团或联成片的，严重患者密布于全身皮肤。囊肿细胞大小一般为0.1-0.5毫米，大者可达1毫米以上。除发生在鱼体表外，鳃、咽喉、肠壁、肠系膜、肝、脾、卵巢等器官上也可能出现。除引起鱼的外行难看外，还可导致鱼的免疫能力下降。肿瘤破裂时形成溃疡面，引起寄生虫、细菌等的继发性感染。病症较轻时，可自愈，2龄以上的鱼感染此病概率小。 临诊:根据外观病状进行诊断和抗原-抗体反应。 * 学习交流PPT 7.5 流行情况 此病在10月至翌年5月，水温10—25摄氏度时为流行的高峰期，在我国全年均可发生。网箱养殖的感染率可达60％以上，池塘为20％—27％。此病在2龄以上的鱼，一般不引起死亡，但鱼体较瘦，外表难看，失去商品价值；有的病鱼囊肿可脱落自