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SARS-COV-2冠状病毒的抗原模拟表位和免疫层析试纸条
技术领域
本发明属于生物技术领域,具体涉及一种新型冠状病毒(SARS-COV-2)的抗原
模拟表位和免疫层析试纸条。
背景技术
新型冠状病毒(SARS-COV-2,或称为2019新型冠状病毒(2019-nCoV)具有极强的
传染性,且对人易致患新型冠状病毒肺炎(COVID-19)。和2003 年的SARS 冠状病
毒以及2012 年的MERS 冠状病毒同属于冠状病毒科β属。2019-nCoV 与2003 年
非典SARS CoV 比对,有约70%序列相似性,与MERS CoV 有40%的序列相似性。
有效地甄别新型冠状病毒感染者是控制疫情蔓延发展的重要前提和手段。基于抗
原抗体免疫反应的免疫学检测方法,具有特异性强、灵敏度高以及操作简单等优
点,可以不需要复杂的仪器设备,在短时间内(15-30 分钟)完成对样品的检测,
在医学诊断领域发挥着重要的作用。对新型冠状病毒感染者的免疫学检测方法既
包括针对待测人体内病毒抗原的直接免疫分析,也包括对待测人体内产生的特异
性针对新型冠状病毒的抗体检测来判断待测人是否被新型冠状病毒感染。其中,
特别是免疫层析试纸条因其操作简便,对实验室设备和操作人员的专业要求较低,
检测快速,非常适合门诊的初步检测或疑是患者的自检。
对于基于新型冠状病毒抗体的免疫检测方法而言,其最重要的是制备检测抗
原。一般而言,可以直接用分离纯化的新型冠状病毒或在解析新型冠状病毒基因
组序列的基础上,设计病毒的某些特异性抗原片段,通过基因合成的方法构建新
型冠状病毒的重组表达抗原,将其作为检测抗原来应用于新型冠状病毒抗体的检
测。直接使用病毒本身作为检测抗原具有一定的传染性风险。重组抗原的制备虽
然是比较成熟的方法,但是仍然存在着制备复杂、表达的重组抗原活性低、与天
然的新型冠状病毒抗体结合能力、亲和力和特异性低等问题。
噬菌体展示肽库技术的主要特点是可快速有效地筛选出与目标靶体特异结
合的噬菌体展示多肽,该技术在探索受体与配体之间相互作用结合位点、寻求高
亲和力生物活性的配体分子、探索未知蛋白质空间结构表位、新型疫苗的研制等
方面应用广泛。
发明内容
本发明的目的之一是提供一种SARS-COV-2 的抗原模拟表位。
实现上述目的技术方案如下。
一种SARS-COV-2 的抗原模拟表位,其氨基酸序列如SEQ ID NO.1 所示。
本发明还涉及编码上述抗原模拟表位氨基酸序列的核苷酸序列,其序列组成
如SEQ ID NO.2 所示或其反向互补序列。
本发明的另一目的是提供上述抗原模拟表位或者含有上述抗原模拟表位的
噬菌体或SARS-COV-2 抗原模拟表位-MBP 融合蛋白在制备SARS-COV-2 新型冠状
病毒免疫学检测试剂盒中的应用。
在其中一个实施例中,所述免疫学检测试剂盒的检测方法为酶联免疫吸附法、
胶体金免疫层析法、或免疫斑点杂交法。
一种SARS-COV-2 新型冠状病毒免疫学检测试剂盒,包括有上述SARS-COV-2
的抗原模拟表位或者含有上述SARS-COV-2 抗原模拟表位的噬菌体或SARS-COV-2
抗原模拟表位-MBP 融合蛋白。
本发明的另一目的是提供一种SARS-COV-2 冠状病毒检测免疫层析试纸条。
实现上述目的的技术方案如下。
一种SARS-COV-2 冠状病毒检测免疫层析试纸条,包括顺次相互搭接地粘结
在底板上的样品垫、结合垫、硝酸纤维素膜、吸水垫,所述结合垫上喷涂有胶体
金标记的抗人IgG 抗体标记物,所述硝酸纤维素膜上设有包被上述SARS-COV-2
的抗原模拟表位或者含有上述SARS-COV-2 抗原模拟表位的噬菌体或SARS-COV-2
抗原模拟表位-MBP 融合蛋白的检测线和包被人IgG 抗体的质控线,所述检测线
和质控线之间相互间隔。
在其中一些实施例中,所述所述硝酸纤维素膜上设有权利要求 1 所述的
SARS-COV-2 抗原模拟表位与MBP 标签的融合蛋白的检测线,所述权利要求1 所
述的SARS-COV-2 抗原模拟表位与MBP 标签的融合蛋白的浓度为0.5-1.5mg/mL,
优选为1-1.2mg/mL,用量为0.8-1ul/mm。
在其中一些实施例中,所述胶体金标记的抗人IgG 抗体的浓度为5-15μg/mL,
优选为10~15μg/mL。
在其中一些实施例中,所述包被的人IgG 抗体的浓度为0.5-1.0mg/mL,优选
为0.6
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