柱前衍生HPLCUV法测定人工牛黄中猪去氧胆酸含量.docVIP

柱前衍生HPLCUV法测定人工牛黄中猪去氧胆酸含量 目录 TOC \o 1-9 \h \z \u 目录 1 正文 1 文1：柱前衍生HPLCUV法测定人工牛黄中猪去氧胆酸含量 1 1 仪器与试药 3 2 方法 3 3 讨论 5 4 小结 6 文2：HPLC法测定清开灵注射液中猪去氧胆酸的含量 7 1 仪器与试药 8 2 方法与结果 http: 8 参考文摘引言： 10 原创性声明（模板） 11 文章致谢（模板） 11 正文 柱前衍生HPLCUV法测定人工牛黄中猪去氧胆酸含量 文1：柱前衍生HPLCUV法测定人工牛黄中猪去氧胆酸含量 DOI：/-.021 Abstract： Objective To establish a pre-column derivation HPLC-UV method for the content determination of hyodeoxycholic acid in artificial calculus bovis. Methods The hyodeoxycholic acid was derived by 2-bromo-2’-acetonaphthoneat using triethylamine as the catalyst in 60 ℃ water bath. After that， a HPLC-UV method was established to determine the content of hyodeoxycholic acid in artificial calculus bovis. Results When the derivatising time at 60 ℃ water bath was 50 min， the radio of the molar amount of derived reagents and hyodeoxycholic was over 20：1 and the radio of catalyst and hyodeoxycholic was over 15：1； the reaction was completed. The calibration curve was linear within the range of –2 μg for hyodeoxycholic acid （r= 7）， and the average recovery was % （D=%）. In this sample， the content of hyodeoxycholic is %. Conclusion The method is with high seitivity， highly reproducible， reliable and accurate for the content determination of hyodeoxycholic acid in artificial calculus bovis。 Key words： artificial calculus bovis； hyodeoxycholic acid； pre-column derivation； HPLC； UV 人工牛黄由牛胆粉、胆酸、猪去氧胆酸、牛磺酸、胆红素、胆固醇、微量元素等加工制成，是天然牛黄的代用品之一[1]，其在中药制剂中的使用可有效缓解天然牛黄资源短缺。猪去氧胆酸为人工牛黄的特征成分之一，测定其含量可在一定程度上控制人工牛黄的质量，同时猪去氧胆酸也是区别人工牛黄和天然牛黄的指标性成分。由于猪去氧胆酸为末端吸收，无法采用高效液相紫外检测器进行检测。目前多采用高效液相蒸发光散射检测法[2-3]和薄层扫描法[4]测定其含量，但灵敏度较低。虽然采用质谱法测定有非常高的灵敏度，但存在仪器价格昂贵、重复性差等缺点。采用柱前衍生HPLC-UV法可以提高灵敏度，同时普适性强。故本试验采用柱前衍生后高效液相紫外检测器检测，对人工牛黄中猪去氧胆酸的含量进行测定。 1 仪器与试药 岛津高效液相色谱仪（LC-20AT），DF-101S集热式恒温加热磁力搅拌器（河南予华仪器有限公司），电子天平（CPA225D，北京赛多利斯仪器系统有限公司），KQ-300B型超声波清洗器（昆山市超声仪器有限公司），MTN-2800D型氮气吹干仪（天津奥特赛恩斯仪器有限公司） 猪去氧胆酸对照品（纯度98%，成都曼斯特生物科技有限公司，中国科学院成都生物研究所，批号MUST-），人工牛黄（产地安徽，批号，购自北京同仁堂），三乙胺（纯度为%，天津市福晨化学试剂厂），2-萘基溴甲基酮（纯度98%，上海晶纯生化