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2.6 花粉/花药特异启动子 烟草花粉特异启动子 TA29,番茄花粉特异启动子 lat52,水稻花粉特异 RA8 gene启动子、玉米ZmC5基因启动子、ZM13启动子都是花粉特异启动子. 花粉特异启动子被广泛用来创造核雄性不育植物。花粉特异启动子–barnase(RNase) 载体已经用来转烟草、油菜、水稻、玉米等;花粉特异启动子还可以进行基因删除,防止外源基因通过花粉污染其它非转基因(作物)植物,提高转基因作物的生物安全性。 第三十一页,共四十三页。 植物基因表达的启动子演示文稿 第一页,共四十三页。 优选植物基因表达的启动子 第二页,共四十三页。 真核启动子比原核更复杂、序列也更长,它不像原核启动子那样有明显共同一致的序列,而且单靠RNA聚合酶难以起动转录,而是需要多种蛋白质因子的相互协调作用。不同真核启动子之间大小、序列很不相同。不同物种的启动子有时不能互用,如动物和植物之间。 真核启动子中包含了许多调节基因转录的元件,它们控制着基因表达的强弱或者时空差异。根据对基因表达的必须性,这些元件分为2类:核心启动子元件和上游启动子元件 第三页,共四十三页。 (1) TATA框(TATA box):位于5′端转录起始点上游约20-30个核苷酸的地方。TATA框是一个短的核苷酸序列,其碱基顺序为TATAATAA。TATA框是RNA聚合酶的重要的接触点,它能够使酶准确地识别转录的起始点并开始转录。当TATA框中的碱基顺序有所改变时,mRNA的转录就会从不正常的位置开始。 (2) CAAT框(CAAT box):位于5′端转录起始点上游约70-80个核苷酸的地方。CAAT框是启动子中另一个短的核苷酸序列, 其碱基顺序为GGCTCAATCT。CAAT框是RNA聚合酶的另一个结合点,一般认为它控制着转录的起始频率,而不影响转录的起始点。当这段顺序被改变后,mRNA的形成量会明显减少。 1. 核心启动子元件(core promoter element): 指RNA聚合酶起始转录所必需的最小的DNA序列,包括TATA盒和 CAAT盒。核心元件单独起作用时只能确定转录起始位点和产生基础水平的转录。 第四页,共四十三页。 11281 tttcccgcct tcagtttagc ttcatggagt caaagattca aatagaggac ctaacagaac 11341 tcgccgtaaa gactggcgaa cagttcatac agagtctctt acgactcaat gacaagaaga 11401 aaatcttcgt caacatggtg gagcacgaca cacttgtcta ctccaaaaat atcaaagata 11461 cagtctcaga agaccaaagg gcaattgaga cttttcaaca aagggtaata tccggaaacc 11521 tcctcggatt ccattgccca gctatctgtc actttattgt gaagatagtg gaaaaggaag 11581 gtggctccta caaatgccat cattgcgata aaggaaaggc catcgttgaa gatgcctctg 11641 ccgacagtgg tcccaaagat ggacccccac ccacgaggag catcgtggaa aaagaagacg 11701 ttccaaccac gtcttcaaag caagtggatt gatgtgatat ctccactgac gtaagggatg 11761 acgcacaatc ccactatcct tcgcaagacc cttcctctat ataaggaagt tcatttcatt 11821 tggagagaac acgggggact cttgac 花椰菜花叶病毒35S启动子=CaMV35S启动子 TATA框(TATA box) CAAT框(CAAT box) 第五页,共四十三页。 2.上游启动子元件(upstream promoter element):包括通常位于-70bp附近的CAAT盒和GC盒、以及距转录起始点更远的上游元件。这些元件与相应的蛋白因子结合能提高或改变转录效率。不同基因具有不同的上游启动子元件,其位置也不相同,这使得不同的基因表达分别有不同的时间与空间表达调控。这些上游启动子元件中,最普遍的是增强子元件。 第六页,共四十三页。 3.增强子(enhancer) 是一种能够提高同一条DNA链上基因转录效率的顺式调控元件。最早是在SV40病毒中发现的长约2
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