大鼠膀胱过度活动症应用稳尿胶囊的治疗作用及机制研究.doc

大鼠膀胱过度活动症应用稳尿胶囊的治疗作用及机制研究 目录 TOC \o 1-9 \h \z \u 目录 1 正文 1 文1：大鼠膀胱过度活动症应用稳尿胶囊的治疗作用及机制研究 1 公式1 4 文2：多受体途径治疗膀胱过度活动症 8 1 临床资料 8 2 结果 9 3 讨论 9 参考文摘引言： 10 原创性声明（模板） 12 文章致谢（模板） 13 正文 大鼠膀胱过度活动症应用稳尿胶囊的治疗作用及机制研究 文1：大鼠膀胱过度活动症应用稳尿胶囊的治疗作用及机制研究 膀胱过度活动症（OAB）是一种以尿急为主要特征的伴有尿频、夜尿、可伴或不伴急迫性尿失禁的临床常见泌尿系统疾病。在尿流动力学上可表现为膀胱逼尿肌过度活动，也可为其它形式的尿道与膀胱功能障碍。引起膀胱过度活动的主要原因为膀胱出口梗阻（BOO），即膀胱颈和/或尿道由于多种原因引起的尿道缩窄导致排尿困难。目前还未能发现针对性治疗膀胱过度活动症的药物及疗法，多以改善症状为主。稳尿胶囊是吉林省中医药科学院泌尿外科专家以传统中医药理论为指导根据长期临床实践总结出的经验方，对机体的泌尿系统、免疫系统、消化系统具有较好的调节作用，可用于治疗具有膀胱过度活动症状的泌尿系统疾病。在具有膀胱出口梗阻病变的一类疾病中，梗阻的发生部位绝大部分位于膀胱颈及近端尿道，例如男性良性前列腺增生症、女性产后膀胱颈梗阻等。因此本研究选用结扎膀胱-近端尿道连接处的大鼠膀胱出口梗阻模型模拟人类膀胱过度活动症以研究稳尿胶囊对膀胱过度活动症的治疗作用。 1、材料与仪器 实验动物 SPF级SD大鼠，雌性，60只，体质量220～240g，由辽宁长生生物技术股份有限公司提供，许可证号：SCXK（辽）2015-0001，将动物于动物室适应性饲养一周，温度为20～24℃，湿度为40%～70%，12h明暗交替照明，给予维持饲料，自由饮水。 实验试剂 酒石酸托特罗定片由山东鲁南贝特制药有限公司生产；大鼠神经生长因子（NGF)ELISA试剂盒由武汉默沙克生物科技有限公司生产；大鼠白细胞介素1β(IL-1β)ELISA试剂盒由上海酶联生物科技有限公司提供；丙二醛（MDA）测定试剂盒（TBA法）、总超氧化物歧化酶（SOD）测定试剂盒（WST-1法）由南京建成生物工程研究所提供。 实验仪器 BL-420E+生物机能实验系统，成都泰盟科技有限公司；科耐普计量智能型恒流泵，重庆科耐普蠕动泵有限公司；全波长酶标仪，Biotek公司；手持式高速匀浆机，上海巴玖实业有限公司；BS124S电子天平，北京赛多利斯仪器系统有限公司；3-18k低温高速冷冻离心机，Sigma公司；XPX-9052MBE数显不锈钢电热培养箱，上海博迅实业有限公司。 2、方法 动物模型的建立与分组给药 将60只SD雌性大鼠，按体重随机分为6组，正常对照组6只，膀胱梗阻模型（BOO）组14只，其余各给药组各10只，分别为稳尿胶囊高剂量组（），稳尿胶囊中剂量组（/kg），稳尿胶囊低剂量组（/kg），阳性对照托特罗定片（/kg）组。大鼠分笼饲养，常规饮食饮水。 大鼠行膀胱梗阻手术模拟大鼠膀胱过度活动症。腹腔注射10%水合氯醛（/100g）对大鼠进行麻醉，麻醉成功后仰卧位固定大鼠于动物手术台，消毒腹部及会阴部，取硬膜外麻醉导管自制导尿管经尿道插入膀胱并固定，用以支撑尿道。沿骨盆趾骨上缘做下腹部正中切口，逐层剪开皮肤、腹直肌层及腹膜，推开覆盖的子宫和附着的脂肪，显露膀胱，沿膀胱向下，稍分离筋膜显露膀胱颈及近端尿道，手术弯针带4-0丝线穿过膀胱颈周围韧带，在靠近膀胱颈-近端尿道处进行结扎，丝线结扎力度以能滑动尿道中导管并带动周围组织为度。以上操作均为同一术者实施。假手术组采用相同术式但不做结扎处理，其余操作相同。结扎后移除导尿管，逐层缝合下腹部切口，局部用碘伏消毒后，腹腔内注射青霉素80万U/只，大鼠保持体温，完全复苏后放回笼中。术后3天大鼠给予同等剂量青霉素抗感染，早晚各一次，并观察大鼠下腹部伤口和排出尿液情况。术后第4天开始给药，给药组按组别灌胃给予不同浓度受试药，每日1次连续6周，假手术组及BOO组灌胃给予同等体积蒸馏水。 观测指标 实验期间观察大鼠一般状态，包括体重、排尿情况、毛发、精神状态等。 末次给药2h后，腹腔注射10%水合氯醛麻醉大鼠，仰卧位固定大鼠，消毒腹部及会阴部，沿腹部原创口位置做一切口，完全暴露膀胱，将膀胱颈周围脂肪、增生组织分离，将膀胱口-近端尿道结扎线拆除，经尿道口插入导尿管导出膀胱内尿液。用镊子轻提膀胱顶端，眼科剪在顶端做一小孔，将两根PE-50软管（）经小孔插入膀胱内部约5mm深，固定软管，软管1连接压力换能器后连接BL-420E+生物机能实验系统，软管2连接蠕动泵，排净系统内残留空气后调零，轻