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探析不同抗性水稻氮代谢及相关基因表达受NaCl影响 目录 TOC \o 1-9 \h \z \u 目录 1 正文 1 文1：探析不同抗性水稻氮代谢及相关基因表达受NaCl影响 1 1、材料和方法 3 2、结果与分析 4 3、讨论 8 文2：安徽省水稻主导品种稻瘟病的抗性探析 10 1 试验材料与方法 10 18倍。静置1～2 d后，将浸泡溶液取样用显微镜进行观察。 11 2 试验结果与分析 11 3 结论 13 参考文摘引言： 13 原创性声明（模板） 14 文章致谢（模板） 15 正文 探析不同抗性水稻氮代谢及相关基因表达受NaCl影响 文1：探析不同抗性水稻氮代谢及相关基因表达受NaCl影响 土壤盐渍化是制约农业发展的重要非生物逆境。盐渍地上由于NaCl大量积累，植物遭受渗透胁迫、离子毒害及氧化胁迫，造成植物种子萌发率降低、叶绿素降解及光合速率降低，从而影响植物的生长[1]。盐胁迫下植株体内离子代谢不均衡，Na+、Cl-等有害离子积累，而P、K+及NO-3含量降低及其他矿质营养缺乏[2] 氮被称为植物的“生命元素”，一些报道发现盐胁迫抑制氮吸收和代谢，尤其影响硝酸盐的吸收。氮代谢水平可以通过氮形态及氮代谢相关酶活性变化表现出来。盐胁迫影响植株NO-3含量的吸收，体内NO-3下降[3];盐胁迫下NH+4含量的变化不同植物反应不同[4，5]。不同植物参与氮代谢酶活性在盐胁迫下有不同表现，Singh等[4]发现番茄幼苗在NaCl处理后硝酸还原酶(NR)、亚硝酸还原酶(NiR)活性及参与氨同化的谷氨酰胺合成酶(GS)、谷氨酸合酶(GOGAT)活性均下降，谷氨酸脱氢酶(GDH)活性升高;张毅等[5]发现盐胁迫下的番茄幼苗中天冬氨酸转氨酶(AST)活性下降;Surabhi等[6]发现盐胁迫下桑树幼苗GS、GOGAT、GDH及AST及丙氨酸氨基转移酶(ALAT)活性均升高。盐胁迫下不同抗性植物品种氮代谢存在差异，NO-3同化过程可能与耐盐性相关。盐胁迫下耐盐荞麦叶片比盐敏感品种能保持较高的NO-3含量、NR和NiR活性[7]，不同抗性甜菜也具有相似表现[8]。植物地上部分和地下部分对盐胁迫的响应存在差异，玉米幼苗在盐胁迫后根系NR活性比对照提高而叶片中酶活性降低[9]，在番茄中NR和GS在叶中酶活性降低而根中酶活性升高。盐胁迫下不同响应差异反映出氮代谢的复杂性[3] 盐胁迫对植物氮代谢的影响在分子水平上也初步进行研究，Lü等[10]研究了鳗草在NaCl胁迫下的转录组，发现盐胁迫后鳗草的NR、NiR基因表达显著上调。相比盐胁迫下氮代谢酶活性的研究，氮代谢相关基因在盐胁迫后的表达变化报道较少。 水稻是重要的粮食作物，盐胁迫下氮代谢调节机制将对整个生命活动起到重要作用，但盐胁迫下氮代谢整个过程的研究还不够系统、深入，特别是不同抗性品种氮代谢相关基因在盐胁迫下差异表达有待研究。 为了探讨水稻的耐盐机制，本研究以抗性品种东稻4号和盐敏感品种日本晴为材料，研究水稻幼苗根和叶中氮的吸收、NO-3的还原及氨同化过程中相关酶活性及基因的表达变化，以探讨抗盐性与氮代谢的关系，为抗性水稻品种的培育及关键基因的筛选提供参考。 1、材料和方法 试验材料及培养 试验选用抗性粳稻()品种东稻4号以及盐敏感品种日本晴( 将水稻种子用%的HgCl2消毒10min，用蒸馏水冲洗3～4次，于蒸馏水中浸泡12h，然后将种子置于培养皿中，在28°C恒温培养箱中催芽萌发。 将萌发后种子置于96孔板中进行水培，培养液为1/4Hoagland营养液(pH值)，光周期/黑暗为14h/10h，温度29℃/25℃。培养12d后进行盐胁迫处理。 青岛农业大学植物生理实验室前期试验表明，在%的NaCl胁迫下2个水稻品种有显著差异，因此，盐处理液用1/4Hoagland营养液配制成%的NaCl溶液，对照组为1/4Hoagland营养液。每天更换一次培养液。处理24h，取根和叶用于基因的检测;4d后，对水稻幼苗叶和根进行取样，用于相关生理指标的测定，所取材料保存于-80℃超低温冰箱中。 试验方法 铵态氮含量测定采用茚三酮显色法[11]，硝态氮含量测定采用水杨酸-硫酸显色法[12] 硝酸还原酶活性参照施晟璐等[13]的方法，谷氨酰胺合成酶GS活性测定参照刘丽等[14]的方法;谷氨酸合成酶NADH-GOGAT及谷氨酸脱氢酶GDH活性测定，参照林清华等[15]的方法;谷氨酸合成酶Fd-GOGAT的测定参照滕祥勇[16]的方法;天冬氨酸转氨酶AST活性测定参照梁成刚等[17]的方法。 采用改良TRIzol法提取总RNA[18]。利用实时荧光定量PCR技术检测氮代谢相关基因，包括硝酸根转运蛋白基因OsNRT1;1、OsNRT1