药物分析学：药物的含量测定.docxVIP

第六章药物的含量测定 第一节概述1、药物的含量是药物质量的主要指标 含量测定（assay）——理化方法测定 效价测定（assay of potency）生物学方法或酶学方法测定2、化学原料药的含量测定：强调测定结果的精密度 3、制剂的含量测定：偏重方法的选择性4、药典对药物的含量限度的表示方法 原料药：以％表示（一般以干燥品或无水物计）凡未规定上限的，药典凡例中规定，其含量上限不得超过101.0% ①按原料药本身形式计算其含量②由于药物组成不定，需以另一种稳定形式计算含量 举例 地塞米松磷酸钠 ——按干燥品计算，含C22H28FNaO8P应为96.0%.102?0% 硫酸庆大霉素——按无水物计算，每Img的效价不得少于590庆大霉素单位 阿司匹林——含C9H6。4不得少于99.5% 氢氧化铝——含氢氧化铝按AI2O3计算，不得少于48.0%5、制剂的含量限度表示方法： ①按标示量计算 标示量=规格量二处方量 例：维生素B1注射液含维生素B1应为标示量的95.0%~ 105.0% ②直接用％含量规定范围 例：复方碘溶液 含 I 应为 4.50% ~5.50% 含 KI 应为 9.5% ~10.5% ③以重量规定含量范围 例：复方磺胺甲嗯哇片磺胺甲嗯陛0.360?0.440g /片 甲氧茉氨嗒咤72.0~88.0mg /片令 常用含量测定方法（2005年版ChP） 仪器法 容量法 其他法 HPLC 29.4% 非水法 15.3% 生物学8.1% VIS-UV 21% 酸碱法 7.5% 重量法0.8% 旋光 0.5% 银量法 3.4% 原子吸收0.3% 碘量法 3.3% GC 0.3% EDTA 法 2.9% 荧光 0.1% 亚硝酸钠法 2.1% 其他容量法 5% 4、AAS法的局限性主要是工作曲线的线性范围较窄，一般为1个数量级；每测一种元素需要更换1个灯，对于 多种元素同时测定时非常不便 第四节色谱分析一、HPLC 法 根据固定相与流动相的极性大小，分为： NP-HPLC——以吸附机理为主RP-HPLC——以分配机理为主 RP-HPLC法适合于中等极性或非极性的弱酸、弱碱和中性化合物的别离分析绝大局部药物均可用RP-HPLC法进行分析 1、RP-HPLC（1）色谱柱：十八烷基硅烷键合硅胶（ODS或C18、C8柱、氨基柱、氟基柱等 （2）流动相：甲醇-水（或缓冲盐）、乙月青-水（或缓冲盐）、四氢吹喃-水（或缓冲盐）（过 滤脱气）（用过缓冲盐或酸碱流动相后，色谱柱必须用低浓度甲醇液冲洗，以除去酸 碱盐，然后再用甲醇冲洗） 洗脱力强弱依次为四氢吠喃一乙睛f甲醇f水（3）化学键合固定相适用pH2?8的流动相；C18链在水相环境中不易保持伸展状态，故流 动相中有机溶剂的比例应不低于5%,否那么C18链的随机卷曲将导致组分保存值的变 化，造成色谱系统不稳定 （4）色谱条件选择调节流动相中有机溶剂比例可调整被测物的保存时间，近似规那么： 流动相中有机溶剂降低10%,溶质的容量因子约增加3倍40%甲醇的强度二33%乙月青二23%四氢映喃 也可用三种、四种混合溶剂作为流动相2、NP-HPLC NP-HPLC硅胶柱流动相溶剂有： ■正己烷-异丙醇；正己烷-乙醇；正己烷-二氯甲烷等 ■洗脱力强弱依次为乙醇-异丙醇一二氯甲烷-正己烷 正-反相色谱相互转换时，须用过渡溶剂依次冲洗 如由反相一正相时，依次用甲醇-异丙醇一正己烷冲洗 而由正相一反相时，那么以反方向进行冲洗3、检测器 （1）选择性检测器 紫外、二极管阵列（DAD）、荧光、电化学 响应值与待测液浓度有关，还与化合物结构有关 （2）通用型检测器 示差折光、蒸发光散射检测器 对所有的化合物均有响应更专属、更灵敏的检测器——质谱 不同检测器对流动相的要求不同，如■紫外检测器应考虑有机溶剂的截止使用波长 ■蒸发光散射检测器和质谱检测器不允许使用含不挥发盐组分的流动相4、系统适用性试验 1.70(%”2+忆/2)(2)别离 1.70(%”2+忆/2) (2)别离度：R =%一 % + % (3)拖尾因子：T = 亚(T=0.95?L05)2d} (4)重复性：取对照溶液，连续进样5次，测得峰面积相对标准差RSD应小于2.0%令 系统的精密度：每次开机后，首先要做的日常工作，不能作为分析方法学研究中的精密 度试验 5、色谱参数测量 为满足系统适用性试验要求，可以改变一些条件，如色谱柱内径、长度、牌号、载体粒度、 流动相流速、组成比例、柱温等，但不能改变固定相种类，流动相组成和检测器类型6、测定方法与应用 定量方法——内标法和外标法 HPLC法是药物制剂、多组分样品分析的首选方法，是各国药典收载的方法中应用最广 的方法 在原料药的含量测定中，HPLC法主要用于多组分抗生素或生化药品，或因所含杂质的 干扰测定