1-2基因工程的基本操作程序(新)XXXX(2).pptVIP

3)将目的基因导入微生物细胞 ①微生物作受体细胞原因： 繁殖快、多为单细胞、遗传物质相对少 ②常用菌：大肠杆菌 ③常用法：Ca2+处理获得感受态细胞 ④过程： Ca2+处理 大肠杆菌 感受态 细胞 感受态细胞 吸收DNA 表达载体 与感受态 细胞混合 方 法 受体 细胞 其他处理 或特点 植物 细胞 农杆菌转化法 基因枪法 花粉管通道法 体细胞、 受精卵 植物组织培养 （脱分化和再分化） 动物细胞 显微注射法 受精卵 动物细胞培养 早期胚胎培养 胚胎移植或胚胎分割移植 微生物细胞 Ca2+处理法 （感受态细胞） 原核细胞 繁殖快，多为单细胞，遗传物质少 （农杆菌Ti质粒的T-DNA的特点：即能进入受体细胞， 又能与受体细胞的染色体DNA整合） 双子叶、裸子 四、目的基因的检测与鉴定 导入过程完成后，全部受体细胞都能摄 入重组DNA分子吗？ 1 真正能摄入重组DNA分子的受体细胞很少。 2 目的基因进入受体细胞后，是否都能稳定维持和表达？ 不一定，需要检测 四、目的基因的检测与鉴定 1、分子水平 检测— 2、个体水平鉴定— ①检测转基因生物染色体的DNA 上是否插入了目的基因 ②检测目的基因是否转录出了mRNA ③检测目的基因是否翻译成蛋白质 抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等 DNA分子杂交 DNA-RNA分子杂交