基因探针分子杂交技术.pptVIP

目录 简介 基本原理 分类 历史及发展 主要应用 当前1页，共28页，星期日。 基因探针 基因探针，即核酸探针，是一段带有检测标记，且序列已知的，与目的基因互补的核酸序列(DNA或RNA)。 FISH 当前2页，共28页，星期日。 基因探针分析的基本原理 两条不同来源的核酸单链如果在一定区段具有互补的碱基序列,或者说具有一定的同源性,就可以特异性结合,形成双链杂种分子,这种结合称为核酸分子杂交。 如果用已知核酸(通常是DNA)片段作为探针,通过与未知核酸(DNA或RNA)样品进行杂交试验,根据两者杂交状况的分析,就可以确定它们同源性程度,检测特定核苷酸序列在样品中的存在及含量。这便是核酸探针分析的基本原理。 当前3页，共28页，星期日。 分子杂交技术的分类 根据其检测对象不同，可分为 检测对象 探针 Southern杂交 DNA 核酸 Northern杂交 RNA 核酸 Western杂交 蛋白质 抗体 根据探针来源的不同，可分为 来源 基因组探针 （genomic probe） 基因组 cDNA 探针 （cDNA probe） mRNA 寡核苷酸探针 （Oligonucleotides?Probe） 人工合成 当前4页，共28页，星期日。 基本操作程序 印迹（blotting） 将样品在凝胶上分离，然后将样品通过“影印”的方式转移到固相支持物上（如滤膜）