生物工业下游技术第八章膜的分离过程.pptVIP

操作步骤 先把DEAE-Sephadex A-50装入3×40厘米的柱中，用pH值为7.6、2.5微摩尔／升的缓冲液上柱，等流出液的pH值为7.6时，然后将样品上柱，用pH值7.6、2.5微摩尔／升～50微摩尔／升的缓冲液进行梯度洗脱(洗脱液浓度从2.5微摩尔／升开始逐渐加大至最终浓度达50微摩尔／升，这样便形成一个洗脱梯度)，收集具有SOD的活性峰。 第六十页，共一百一十二页。 第六十一页，共一百一十二页。 第六十二页，共一百一十二页。 第六十三页，共一百一十二页。 第六十四页，共一百一十二页。 操作步骤 将洗脱液倒入透析袋中，在蒸馏水中进行透析(透析方法是利用小分子物质在溶液中通过透析袋，而蛋白质和粘多糖等大分子不能通过透析袋的性质而达到不同大小分子分离的一种方法)，然后将透析液经超滤浓缩后，冷冻干燥即为SOD产品。 第六十五页，共一百一十二页。 新鲜猪血 分离血球 黄色血浆（供制备凝血酶用） 红血球 血红蛋白（弃去） 离心液 沉淀 清夜（弃去） 沉淀物 热变 沉淀（弃去） 上清液 上清夜（回收） 沉淀 溶解 杂物（弃去） 上清液 DEAE－Sephadex A-50分离纯化 洗脱液 透析液 浓缩干燥 除血红蛋白 冷丙酮 产品 从猪血中提取SOD 第六十六页，共一百一十二页。 操作步骤 分离血球：取新鲜牛血，按100kg牛血加3.8g柠檬酸三钠