胰岛素肾上腺素对血糖浓度的影响实验设计说明.pdfVIP

.. .. .. 胰岛素、肾上腺素对血糖浓度的影响 【实验目的】 观察胰岛素和肾上腺素对家兔血糖浓度的影响。 掌握血糖浓度的测定方法。 掌握血糖浓度的正常参考值、了解血糖测定的临床意义。 【实验原理】 血清中的糖称为血糖 ，绝大多数情况下都是葡萄糖。体内各组织细胞活动所需的能量大部 分来自葡萄糖 ，所以血糖必须保持一定的水平才能维持体内各器官和组织的需要。正常人 在清晨空腹血糖浓度为80～120毫克/100ml。 使血糖浓度降低的激素 ：胰岛素 胰岛素对血糖的调节机制 ，首先是使肌肉和脂肪组织细胞膜对葡萄糖的通透性增加 ，利于 血糖进入这些组织进行代谢。胰岛素还能诱导葡萄糖激酶、磷酸果糖激酶和丙酮酸激酶的 合成 ，医学教|育网搜集整理加速细胞内葡萄糖的分解利用。胰岛素通过使细胞内cAMP含 量减少 ，激活糖原合成酶和丙酮酸脱氢酶系 ，抑制磷酸化酶和糖异生关键酶等 ，使糖原合 成增加 ，糖的氧化利用、糖转变为脂肪的反应增加 ，血糖去路增快 ；使糖原分解和糖异生 减少或受抑制 ，使血糖来源减少 ，最终使血糖浓度降低。 使血糖浓度升高的激素 ：肾上腺素 肾上腺素的作用机制是通过肝和肌肉的细胞膜受体、cAMP、蛋白激酶级联激活磷酸化酶, 加速糖原分解,使血糖升高.在肝脏,糖原分解为葡萄糖,在肌肉,则经糖酵解途径生成乳酸,并通 过乳酸循环间接升高血糖水平.主要在应急情况下发挥调节作用.是强有力升高血糖的激素。 邻苯甲胺法 ：本实验采用邻甲苯胺法测定血糖 ，其原理是葡萄糖在酸性介质中加热脱水反 应生成 5－羟甲基－2－呋喃甲醛，分子中的醛基与邻甲苯胺缩合成青色的薛夫氏碱，通过 专业word可编辑 . .. .. .. 比色可以定量 【实验试剂】 肝素抗凝剂、凡士林、二甲苯、抗凝剂、胰岛素、0.1%肾上腺素液、邻苯甲胺试剂、蒸馏 水、葡萄糖标准液 【实验操作】 1.动物准备及采血 取空试管4 支 ，编号 1,2,3,4，分别加入肝素抗凝剂0.01ml。取空腹 16小时以上的家兔两 只，分别编号1,2，称体重并记录。 用耳静脉采血法:先剪去兔儿静脉的毛 ，再用二甲苯擦拭兔耳部静脉 ，使其充血 ，在其周围 抹上凡士林防止血液污染，用刀片轻轻挑破边缘耳静脉，放血入含抗凝剂的试管1和2 ，约 需2ml至3ml ，边滴边摇 ，以防凝固，取血完毕 ，用干棉球压迫血管止血。 2.注射激素并采血 1号兔臀部皮下注射胰岛素，一小时后于心脏取血到抗凝管3，测定血糖 ，将2号兔臀部皮 下注射0.1%肾上腺素液，剂量为每公斤体重0.4ml ，观察兔子情况。30mins后 ，心脏取血 入抗凝管 4 中。心脏采血法 ：将注射器肝素化后 ，置家兔于仰卧位 ，固定四肢，在左侧胸 壁3至4 肋间 ，摸到心搏最明显处，垂直进针 ，深度约3cm，当有落空感时，可感觉针尖 随心搏而动，固定针头，采血8ml左右 ，放入抗凝管中。 3.测定注射前后的血糖 将收集的4 管血液离心 10mins，取上层血浆 ，分别制成胰岛素前1，胰岛素后2 ，肾上腺 素前 1，肾上腺后2。取干燥的试管6支 ，编号并按表操作，混匀 ，放入沸水浴 15mins， 冷却 ，用波长630nm进行分光测定 ，读取吸光度值 ，并按下列公式计算葡糖含量。 葡萄糖mg/100ml 血浆=测定管吸光度/标准管吸光X100% 专业word可编辑 . .. .. .. 试剂/ml 测管1 测管2 测管3 测管4 标准管 空白管 血清 0.1 0.1 0.1 0.1 X X 葡萄糖标 X X X X 0.1 X 准液 蒸馏水 X X