基因工程和基因组学 .pptVIP

4.1 目的基因的获取 目的基因的获取大概有以下途径： 1化学合成法 如已知目的基因的核酸序列，则可以利用化学合成 法进行人工合成。 2 基因组DNA 可以从基因文库中筛选出目的基因。 * 第三十张，课件共七十二张，编辑于2022年5月 3 cDNA法 通过提取mRNA，然后进行反转录得到目的基因。 4 PCR法 用特异的引物，通过聚合酶链式反应来扩增目的基因。 * 第三十一张，课件共七十二张，编辑于2022年5月 PCR的基本原理 变性、复性、半保留复制 PCR三步曲 变性 90～97℃ 退火 45～55℃ 延伸 72℃左右 * 第三十二张，课件共七十二张，编辑于2022年5月 P C R 操作流程 90 0 C 50 0 C 70 0 C * 第三十三张，课件共七十二张，编辑于2022年5月 PCR 的三个步骤为一次循环，约需5－10 分钟。每经一次循环，所找到的目的基因扩充一倍。经过 20 次循环，即可扩增 106 倍，总共只需几个小时。 * 第三十四张，课件共七十二张，编辑于2022年5月 4.2 目的基因和载体的连接 外源基因离开染色体是不能复制的。如果将外源基因连到复制子上，外源基因则可作为复制子的一部分进行复制。这种复制子就是载体。 载体可分为复制载体和表达载体。 表达载体是将外源基因在寄主细胞内表达成蛋白质的载体。 作为表达载体必须具有强的启动子和