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第2讲 细胞工程
1.(2021·湖北高考模拟)下图是利用现代生物技术改良草莓品系的过程,请回答下列有关问题:
(1)图中涉及的现代生物技术有转基因技术、植物体细胞杂交技术、植物组织培养技术。
(2)请简述I过程的基本方法:先利用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁,获得具有活力的原生质体;然后借助一定的技术手段(物理或化学方法)诱导原生质体融合。A培育至具有凤梨风味的绿草莓幼苗的过程,能(填“能”或“不能”)体现植物细胞的全能性。
(3)研究人员根据已知的胰岛素基因序列,可采用化学合成方法获得胰岛素基因。
(4)转基因技术和细胞工程在改良动植物类型过程中都有广泛应用,但是,胚胎工程只是指对动物的配子或早期胚胎所进行的多种显微操作和处理技术。
[解析] (1)图中涉及的现代生物技术有转基因技术、植物体细胞杂交技术、植物组织培养技术。(2)图中I过程的基本方法是先用酶解法去除获得具有活力的原生质体、然后诱导原生质体融合。图中A培育至具有凤梨风味的绿草莓幼苗的过程,采用了植物组织培养技术,体现了植物细胞的全能性。(3)由于已知胰岛素基因序列,所以研究人员可根据已知的胰岛素基因序列,采用化学合成的方法获得胰岛素基因。(4)胚胎工程只是指对动物的配子或早期胚胎所进行的多种显微操作和处理技术,有胚胎移植和胚胎分割移植等。
2.(2020·陕西高考模拟)类风湿性关节炎(RA)是一种自身免疫病,致残性强。研究表明,该病的病理改变与肿瘤坏死因子-a(TNF-a)密切相关,而一种人鼠嵌合的抗TNF-a单克隆抗体能有效治疗RA。下图为该单克隆抗体制备过程示意图。
(1)动物细胞培养技术是单克隆抗体技术的基础,该过程中需要的气体条件是95%空气和5%CO2。
(2)图中的抗原A是肿瘤坏死因子-a(TNF-a),常用的促融剂是聚乙二醇(PEG)。图中“( )和抗体检测”,括号内应填克隆化培养。
(3)细胞融合完成后,融合体系中除含有未融合的细胞和杂交瘤细胞外,可能还有骨髓瘤细胞自身融合细胞、淋巴细胞自身融合细胞。体系中出现多种类型细胞的原因是细胞融合是随机的,且融合率达不到100%。
(4)单克隆抗体主要的用途有:作为诊断试剂、用于治疗疾病、用于运载药物(至少答出两点)。
[解析] (1) 动物细胞培养技术是动物细胞工程的基础,是单克隆抗体技术的基础。该过程中需要的气体条件是95%空气和5%CO2,以保证细胞代谢所必需的氧气和培养液的pH。(2) 要制备抗TNF-a单克隆抗体需要给小鼠注射肿瘤坏死因子-a(TNF-a)。常用物理或化学方法促融,最常用的化学促融剂是聚乙二醇(PEG)。在抗体检测之前需要进行克隆化培养,以增加杂交瘤细胞数量。(3) 细胞融合是随机的,且融合率达不到100%,所以细胞融合完成后,融合体系中除含有未融合的细胞和杂交瘤细胞外,可能还有骨髓瘤细胞自身融合细胞、淋巴细胞自身融合细胞。(4)单克隆抗体最广泛的用途是作为诊断试剂;也可用于治疗疾病、用于运载药物,主要是用于癌症治疗,也有少量是用于其他治疗的。
3.(2020·山东省泰安市生物模拟)埃博拉病毒(EBO)呈纤维状,EBO衣壳外有包膜,包膜上有5种蛋白棘突(VP系列蛋白和GP蛋白),其中GP蛋白最为关键,能被宿主细胞强烈识别。请回答下列问题:
(1)要获得编码GP蛋白抗原的基因疫苗,首先要提取出病原体的RNA,并利用RNA经逆转录合成DNA,构建cDNA文库。cDNA文库中的基因可以_(选填“可以”“不可以”“部分”)进行物种间的基因交流。
(2)为了从牛分泌的乳汁中提取GP蛋白,需将GP蛋白基因通过显微注射法(方法)导入牛受精卵中。在基因导入牛受体细胞前,基因的首段必须含有使其仅能在牛的乳腺细胞中特异性表达的(乳腺蛋白基因的)启动子,驱动转录过程。转基因牛是否培育成功,可以通过抗原-抗体杂交_技术从分子水平上进行检测。
(3)以GP蛋白作为疫苗比利用毒性减弱的埃博拉病毒作疫苗更安全,其原因是GP蛋白自身没有感染能力,但保留了抗原特性_。
(4)科研人员利用经EBO免疫后小鼠的B淋巴细胞与小鼠的骨髓瘤细胞进行融合以形成杂交瘤细胞,培养后可以获得纯净的单一品种抗体,其特点是特异性强、灵敏度高、并可能大量制备,可以用此抗体与药物制成“生物导弹”抗击EBO。
[解析] 以RNA为模板合成DNA的过程为逆转录过程,该过程需要逆转录酶的催化;cDNA文件中的基因可以进行物种间的基因交流。 (2)将目的基因导入动物受体细胞一般采用显微注射法。为了从牛分泌的乳汁中生产GP蛋白,在基因导入牛受体细胞前,基因的首段必须含有使其仅能在牛的乳腺细胞中特异性表达的(乳腺蛋白基因的)启动子,才能驱动转录过程。 (3)以GP蛋白作为疫苗比基因疫苗更安全,其原因是GP蛋白自身没有感染能力,但保留有抗原性。 (4
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