《生物监测》教学课件—03水体中细菌指标的检测.pptVIP

* * * * * * * * * * * * * * * * * * * 污染物排放标准： 污水类型 一级标准 二级标准 三级标准 医院、兽院及医疗机构含病原体污水 ≤500 ≤1000 ≤5000 传染病、结核病医院污水 ≤100 ≤500 ≤1000 二、测定方法（多管发酵法 ） 任务四 水中粪大肠菌群的测定 1.初发酵试验 水样 1mL EC培养液 各1mL 各1mL 各10mL 10-1 37℃ 24h 44.5℃ 24h - - - - - - - - - - + + + + + 2.复发酵 + + + + - 倒管有气泡为阳性 任务四 水中粪大肠菌群的测定 根据发酵阳性管的数目查MPN表，按总大肠菌群的计算方法计算每升水中粪大肠菌群细菌的MPN值 项目三水体中细菌指标的检测任务五 总大肠菌群、粪大肠菌群的快速测定 生物监测 测定的意义 测定方法 任务五 水中总大肠菌群、粪大肠菌群的快速测定 本方法适用于医院污水、生活污水、垃圾渗滤液，以及其他行业(如餐饮业、食品加工等)排入地表水中的污水，快速测定总大肠菌群或粪大肠菌群。 一、方法原理 应用灭菌的滤纸吸收选择性培养基，细菌通过滤纸纤维膨胀而被固定并生长繁殖，大肠菌群在发育时伴随产生琥珀酸脱氢酶将纸片上的TTC(红四碳唑)还原成不可逆的甲臢(Formazane)产生红色色素，即大肠菌在纸片培养基上呈红色菌落，菌落周围产生黄圈是大肠菌分解乳糖产酸使指示剂变色的结果。 二、方法和步骤 用采水器或其他灭菌器采集水样500mL放入灭菌瓶内，如果是经加氯处理的废水，需加15%硫代硫酸钠5mL除去余氯。 二、水样采集 任务五 水中总大肠菌群、粪大肠菌群的快速测定 水样 1mL 10-1 各10mL 各1mL 各1mL 55.5mL 总大肠菌群37℃下培养18-24h 粪大肠菌群44.5℃下培养18-24h 任务五 水中总大肠菌群、粪大肠菌群的快速测定 阳性 任务五 水中总大肠菌群、粪大肠菌群的快速测定 根据发酵阳性管的数目查MPN表，按总大肠菌群的计算方法计算每升水样中总大肠菌群数和粪大肠菌群数。 感谢观看，欢迎批评指正 * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * 项目三水体中细菌指标的检测任务一 样品的采集和保存 生物监测 样品的采集 样品的保存 一、水样的采集 1. 采水容器 ① 采样瓶：具磨口玻塞的500mL广口瓶 ② 采样瓶的洗涤 ③ 采样瓶的灭菌: 160～170℃干热灭菌2h，或用高压蒸汽灭菌器，121℃灭菌15min 2. 采样步骤及注意事项 (1)去氯和高浓度重金属： 去重金属：500mL采样瓶加入1mL15%EDTA-Na2溶液 去氯：500mL采样瓶加入0.3mL10%Na2S2O3溶液; 一、水样的采集 (2) 采集江、河、湖、库等地表水样时，可握住瓶子下部直接将已灭菌的带塞采样瓶插入水中，约距水面10～15cm处采集 （3）采集一定深度的水样时，可使用单层采水器或深层采水器 （4）从自来水龙头采集样品时，采水前可先将水龙头打开至最大，放水3～5min，用酒精灯火焰灼烧约3min灭菌，再放水1min,然后采样 （5）在同一采样点进行分层采样时，应自上而下进行，以免不同层次的搅扰；同一采样点与理化监测项目同时采样时，应先采集细菌学检验样品 （6）采样完毕，做好记录 二、样品保存 采好的水样，应迅速运往实验室，进行细菌学检验。一般从取样到检验不宜超过2h，否则应保存在10℃以下，但不得超过6h 项目三水体中细菌指标的检测任务二 细菌总数测定 生物监测 细菌总数测定的意义 测定方法及步骤 （地表水） 菌落计数 计算和报告 任务二 细菌总数的测定 细菌总数：指lmL水样在营养琼脂培养基中，于37℃培养48h后，所生长细菌菌落的总数。 一、细菌总数测定的意义 ?可以作为水体有机污染程度的指标 ?生活饮用水的细菌总数lmL不得超过100个 污染程度 重污染河段 中污染河段 轻污染河段 未污染河段 细菌总数 10万个/ml以上 10万个/ml以下 1万个/ml以下 100个/ml以下 室内空气质量标准＜2500caf/m3 （撞击法） 任务二 细菌总数的测定 二、测定方法及步骤 （地表水） 1.稀释水样 2.接种水样 3.培养：37℃下倒置培养24h 测定方法：平皿计数法 任务一 细菌总数的测定 水样 1mL 1mL 1mL ck ck 10-1 10-1 10-2 10-2 10-3 10-3 1mL 1mL 1mL 1mL 1mL 1mL 三、菌落计数 37℃ 48h 9mL无菌水 10－3 10－2 10－1 任务二 细菌总数