昆虫sf9细胞培养知识讲解.docxVIP

精品文档 精品文档 精品文档 Sf9培养要点： 温度：27-28摄氏度 pH: , sf9最适的pH6.2，随培养时间的延长， Ph值会增加 传代时间：72h （三天左右） 细胞来源：Sf9 （货号B825-01 ）和Sf21 （货号B821-01）细胞系是传统的用于杆状病毒表达 的细胞系，源于美国农业部昆虫病理实验室。此细胞系适用于 InsectSelect系统。这两株细 胞衍生于IPLBSF21细胞系，来源于秋蝇蠕虫（草地夜蛾）蛹的卵巢组织。（以上来自invitrogen ） 细胞特点：规则的带有颗粒球形。贴壁紧。 标准条件的定义： 培养最低密度：0.6X 106/ml （健康对数生长期细胞活率至少应不低于 90%。活率低于90% 细胞不是在最佳条件下培养不能用于实验） 1 X 106/mL将出现对数生长状态 传代培养：传代培养需将细胞调整到维持对数生长状态和最大活率。 贴壁培养：贴壁细胞传代需在细胞长成单层（如下定义）然后 1： 5 （细胞体积：最后培养 基体积）稀释维持对数生长。形成单层细胞可以传代培养 悬浮培养：在细胞密度达到 2.0X 106-2.5X 106细胞/mL后将密度调整至 0.7X 106-1.0x 106 细胞/mL进行悬浮传代。确保传代细胞密度不高于 4X 106个/mL或保持密度高于1 X 106个 /mL以达到对数生长状态。 培养瓶（0111） Sf