动植物细胞培养产酶 (2).pptVIP

四、动物细胞培养的工艺条件及其控制 工艺流程： 制备细胞悬液→接种→培养→收集培养液→分离纯化目的物 第31页，共44页，2022年，5月20日，12点30分，星期四 关于动植物细胞培养产酶 (2) 第1页，共44页，2022年，5月20日，12点30分，星期四 概述 动植物细胞培养定义： 是通过特定技术获得优良的动物和植物细胞，然后在人工控制条件的反应器中进行细胞培养，以获得所需产物的技术过程。 第2页，共44页，2022年，5月20日，12点30分，星期四 概述 获取方法 培养方式 培养目的 动物细胞 离心分离、 杂交瘤技术、胰蛋白酶消化 悬浮培养、 贴壁培养、 微载体培养 获得功能蛋白质 植物细胞 机械捣碎、 酶解、 诱导愈伤组织、 分离原生质体 固体培养、液体浅层培养、 液体悬浮培养 获得次生代谢产物 第3页，共44页，2022年，5月20日，12点30分，星期四 第一节 动植物细胞中酶生物合成的调节 动植物细胞更复杂，调节层次更多。 细胞水平 个体水平（激素、神经水平） 下面着重从细胞水平讨论。 第4页，共44页，2022年，5月20日，12点30分，星期四 第一节 动植物细胞中酶生物合成的调节 一、细胞分化改变酶的生物合成 原因：基因表达具有时空性 如： 胰蛋白酶主要在胰细胞中合成 木瓜蛋白酶主要在果皮细胞中合成 端粒酶在胚胎细胞、生殖细胞、干细胞、分化程度低的癌细胞中具活性。 第5页，共44页，2022年，5月20日，12点30分，星期四 第一节 动植物细胞中酶生物合成的调节 2、基因扩增加速酶的生物合成 即通过增加基因的数量来调节基因表达的一种方式。如：对药物的抗性。 3、增强子促进酶的生物合成 增强子能促进同源或异源启动基因的转录活性。 4、抗原诱导抗体酶的生物合成 半抗原诱导法 酶蛋白诱导法 第6页，共44页，2022年，5月20日，12点30分，星期四 第二节 植物细胞培养产酶 近年来通过植物细胞培养产酶的研究已经取得可喜进展 第7页，共44页，2022年，5月20日，12点30分，星期四 含酶制品——嫩肉粉 第8页，共44页，2022年，5月20日，12点30分，星期四 第二节 植物细胞培养产酶 一、植物细胞的特性 大 生长及代谢率低 营养要求简单 需光 对剪切力敏感 生产次级代谢产物 第9页，共44页，2022年，5月20日，12点30分，星期四 第二节 植物细胞培养产酶 二、植物细胞培养的特点 提高产率 缩短周期 易于管理，减轻劳动强度 提高产品质量 其他：需光照等 第10页，共44页，2022年，5月20日，12点30分，星期四 第二节 植物细胞培养产酶 外植体的选择和处理→愈伤组织的诱导→ 细胞的获取→细胞培养→分离纯化→产物 外植体的选择与处理： 选择外植体、切取片段、消毒处理。 植物愈伤组织 直接分离法 机械捣碎发：动作轻柔 酶分解法：纤维素酶、果胶酶等 过滤、离心分离 愈伤组织诱导法 能迅速增殖、无特定结构和功能的薄壁细胞团 外植体 半固体培养基 灭菌、冷却 生长素、分裂素 插入 培养 25℃ 愈伤组织 1-3周 分散、接种 原生质体再生 去除细胞壁后得到的微球体 三、植物细胞培养的工艺条件及其控制 （一）植物细胞培养的工艺流程 植物细胞的获取： 第11页，共44页，2022年，5月20日，12点30分，星期四 第二节 植物细胞培养产酶 三、植物细胞培养的工艺条件及其控制 （一）植物细胞培养的工艺流程 外植体→细胞的获取→细胞培养→分离纯化→产物 1、外植体的选择与处理 2、植物细胞的获取 3、细胞悬浮培养 4、分离纯化 第12页，共44页，2022年，5月20日，12点30分，星期四 第二节 植物细胞培养产酶 三、植物细胞培养的工艺条件及其控制 （二）植物细胞培养的培养基 1、植物细胞培养基的特点 与微生物培养基的主要不同点如下： （1）植物细胞的生长和代谢需要大量的无机盐 （2）植物细胞需要多种维生素和植物生长激素 （3）植物细胞要求的氮源一般为无机氮源 （4）植物细胞一般以蔗糖为碳源 第13页，共44页，2022年，5月20日，12点30分，星期四 第二节 植物细胞培养产酶 三、植物细胞培养的工艺条件及其控制 （二）植物细胞培养的培养基 2、几种常用的植物细胞培养基 1）MS培养基 硝酸盐浓度高，广泛用于培养植物细胞、组织及原生质体。 2）B5培养基 铵的浓度较低，适于双子叶植物特别是木本植物的组织、细胞培养。 3）White培养基 无机盐浓度低，适用于生根培养。 4）KM-8P培养基 主要用于原生质体培养。 第14页，共44页，2022年，5月20日，12点30分，星期四 第二节 植物细胞培养产酶 三、植物细胞培养的工艺条件及其控制 （二）植物细胞培养的培养基 3、植物