第二章生物制药工艺技术基础.pptVIP

3．重组体的表达系统 （1）原核表达系统 ①E.coli；②芽孢杆菌Bacillus；③链霉菌Streptomyces 优点：易大量生产，成本低，周期短 缺点：多为胞内表达、提取困难，易生成包含体、含起始密码Met(AUG)，有内毒素毒性 第29页，共53页，编辑于2022年，星期一 （2）真核表达系统 ①酵母表达 毕赤酵母（pichia psatoris）受甲醇诱导 优点：易培养无毒性，易高密度发酵（100g/L），高表达，成本低，产物可糖基化，有分泌表达。 ②动物细胞 哺乳动物细胞——CHO（仓鼠细胞） 昆虫细胞——家蚕细胞 第30页，共53页，编辑于2022年，星期一 4．表达产物的纯化 包含体 inclusion bodies: 大部分是表达产物，（还有细胞蛋白和膜蛋白）一级结构正确、无活性，不溶于水，可用变溶剂SDS尿素，盐酸胍溶解，再稀释透析除去变性剂，使其复性。 第31页，共53页，编辑于2022年，星期一 为防止或减少包含体的形成常用方法： （1）降低培养温度 从37℃降到30℃可显著降低包含体形成率。 （2）以硫氧还原蛋白为载体进行融合表达。 硫氧还原蛋白是E.coil的一种同源蛋白，定位于粘附