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第1页，共6页，2022年，5月20日，22点18分，星期三 一、目的要求 学习从牛乳中制备酪蛋白的原理和方法。 二、原理 牛奶含有半乳糖、蛋白质、脂肪成份。蛋白质中的酪蛋白通过等电点沉淀，再通过离心而获得，糖类小分子由于处于清液中而分离，沉淀物中所含的脂肪通过有机溶剂抽提而去除，最终得到纯白色、晶状酪蛋白。 第2页，共6页，2022年，5月20日，22点18分，星期三 三、试剂与器材 试剂：0.2 mol/L HAc-Na buffer、 95%乙醇、乙醚 器材：离心机、水浴锅、pH计 第3页，共6页，2022年，5月20日，22点18分，星期三 10mL牛奶 预热 调pH至4.7 室温冷却 离心得 沉淀 于离心管内悬浮 离心 得沉淀 于离心管内去脂肪 漏斗过滤 滤干 洗涤 洗涤（脂肪完毕） 带 滤纸烘干 称重 计算。 40°C 40°C预热的醋酸buffer 10mL 边加边搅拌 5000r/min 5min 4mL H2O 5000r/min 5min 20mL乙醇 5min 20mL乙醇 微搅动 20mL乙醇乙醚混合液（1:1） 20mL乙醚 60°C,4h 四、操作方法 第4页，共6页，2022年，5月20日，22点18分，星期三 五、计算 实际获得百分率= ╳ 100% 六、注意事项 1、牛奶与缓冲液要预热 2、缓冲液要缓加缓搅 3、在滤纸上样品的脱脂过程要搅动，不得 破滤纸 4、实验环境要保持空气流通，门窗要开 酪蛋白质量（g） 10mL 牛奶 第5页，共6页，2022年，5月20日，22点18分，星期三
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