卫生统计学综合实验课中文.pptxVIP

;课堂内容;课堂内容;课堂内容;; 了解毒理学实验工具的优缺点;课堂内容;课堂内容;课堂内容;动物实验;分类;性别：对于首次试验的受试物，要用两种性别实验动物。若已知不同性别的动物对受试物敏感性不一，要选择敏感的性别。 年龄和体重：毒理学试验选用实验动物的年龄取决于试验类型。如急性试验通常用成年动物；慢性试验因实验周期较长，要选用较年幼或刚断乳的动物。实验动物年龄应按其出生日期来计算，但实际工作中一般以动物体重粗略地判断其年龄，体重是选择适龄动物的依据。同一试验中，组内个体间体重差异要小于10%，组间平均体重差异不应超过5%。 生理状态：应选用未产未孕的雌性动物。雌雄动物应分笼饲养。但是，在显性致死试验、致畸试验、繁殖试验等，需要有计划地合笼交配。 健康状况：健康动物。;健康的实验动物;动物实验部分;代谢酶动力学基本理论;背景介绍 米氏动力学 图形表示 可逆抑制 不可逆抑制 总结;;外源物;;代谢酶动力学基本理论;米氏动力学;底物、单酶（即单位点） 稳态的动力学模型;;K1;;;Lineweaver-Burk （双倒数作图法）;Eadie-Hofstee 作图法 ;Hill方程：;可逆抑制剂: 与酶以非共价键结合而引起酶活性的降低或丧失，可用透析等物理方法除去抑制剂，恢复酶的活性。;遵循米氏动力学：;E+S;非竞争性抑制: 不仅可以与游离酶结合，也可以与ES复合体的不同结合位点结合。;E+S;反竞争性抑制: 仅与ES复合物结合。;Lineweaver-Burk 作图法;竞争性;与酶反应，与蛋白质形成共价结合物。;Polasek Miners (2007) Expert Opin Drug Metab Toxicol 3(3):321-329; 持续酶反应时，发生时间依赖性失活 不可逆 反应中间体 失活速率遵循米氏动力学模式 ;Kobs 表观失活速率常数 Kinact 最大失活速率常数 KI 不可逆抑制常数 I 失活剂浓度 E(t) 特定时间的活性酶浓度;代谢酶动力学研究;;;例子;例子;例子;例子;I相代谢研究—酯酶; ; ; ;依那普利; ; ; ; ; ;CES的结构特点; ; ;底物的酯交换反应;酯酶的动力学; ; ; ; ; ; ;人体中的主要酯酶; ;羧酸酯酶同工酶在毒物代谢中的作用; ;CBF的水解作用—种属差异; ; ;Boc5的水解作用—代谢通路; ; ; ;酯酶的分配;动力学研究;Proteins with Esterase-like Activity; ;3, 酯酶-UGT 酯酶-转运蛋白相互作用;基于酯酶的前体药物设计; II相酶研究; ;排名在前200药物的消除路径;研究意义;磺基转移酶Sulfotransferases, SULT;;;SULT酶分类-基因相似性;SULT酶三维结构;人体SULT亚型酶分布及底物特征;肝S9孵育体系 肝S9 2mg/mL MgCl2 终浓度 5mM 磷酸盐缓冲溶液 pH 6.8/7.4 底物 （0.25~10mM 终浓度） PAPS (50-500uM 终浓度);小 结;儿茶酚胺氧位甲基转移酶Catachol-O-Methyltransferase, COMT;儿茶酚胺氧位甲基转移酶简介;COMT催化机理;;COMT三维结构;COMTs酶分类—催化反应类型;人体COMTs酶分类及分布; 酚类 儿茶酚类 脂肪族和芳香族胺类 氮杂环化合物 含巯基的化合物 金属也能被甲基化 无机汞和砷都能被单-和双-甲基化。 无机硒能被三甲基化。;;COMTs酶抑制剂;COMTs酶抑制剂;;小 结;;;Fig. Domain structure of UGT.;UDP-葡萄糖醛酸转移酶是一个超家族，包括两个家族(UGT1和UGT2)和三个亚族 (UGT1A, UGT2A和UGT2B)。; UGT酶表现出广泛并通常是交叉的底物特异性。人体UGT酶的底物多种多样，包括许多外源性有害物质（药物、毒物、治癌剂等）以及许多人体内源性物质（胆红素、胆汁酸、激素等）。 UGT介导的葡萄糖醛酸化反应过程不但会影响这些化合物在机体内的浓度，还能导致多种生理学、药理学行为的改变。 ; 特异性探针可以用来标定一系列肝微粒体中的活性并通过相关性分析确定在人肝中介导某化合物代谢