免疫组化技术.pptxVIP

四大常用基本技术;免疫组织化学技术;免疫组化技术的分类;基本原理; 免疫组化的全过程;常用标本的获得;免疫组化对组织和细胞标本的要求 ： 保持所检标本原有的结构、形态； 在原位最大程度地保持待测抗原(或抗体)的免疫活性，既不淬灭、流失或弥散，也不被隐蔽。 各种抗原由于其含量及特性的差异对标本处理方式常有不同要求，因此要选择适用于本实验的最佳方法。 ; 标本的获得;标本的固定与保存;常用固定剂;常用固定剂;常用固定剂;常用固定剂;戊二醛： 穿透性强，微细结构保存好，但对抗原有一定影响，常与其他固定剂联合用作免疫电镜固定液。;常用固定剂;常用固定剂; 冰冻切片和石蜡切片是免疫组化中最常用的制片方法。 冰冻切片 制片方法简单 较好的保存组织的抗原免疫活性，避免石蜡切片因固定、脱水、浸蜡等步骤造成的抗原损失。 细胞内易形成冰晶而破坏细胞结构，可能会使抗原弥散 切片厚度较石蜡的厚，做的片子没石蜡的漂亮 ;石蜡切片：观察组织细胞结构的理想方法 较好的保持组织细胞的形态结构 切片有连续性 长期存档，供回顾性研究 由于石蜡切片可以切到4微米左右，所以原位杂交探针容易渗透到组织中去，容易成功，而且得到的颜色/形态都较冰冻切片好。 抗原的保存量不如冰冻切片。;抗原修复;抗原修复;抗原修复;抗原修复;抗原修复;抗原修复; ;抗体的分类;抗体的选择（一抗）;一抗的获得;抗体的标记（二抗）;常