细菌与酵母表面展示技术教学材料.pptVIP

基于冰核蛋白的狂犬病毒糖蛋白细菌表面展示 冰核蛋白是丁香假单胞菌的外膜蛋白，可加速纯水的冰晶形成，它通过糖基磷脂酰肌醇锚定在细菌表面，利于大分子蛋白的表面呈现。 狂犬病毒糖蛋白是病毒与宿主细胞结合的配体，介导病毒与靶细胞结合。而且是狂犬病毒的主要保护性抗原，能刺激机体产生抗体，保护机体抵抗病毒感染。 方法： 1 冰核蛋白N末端序列的PCR扩增 2 狂犬病毒糖蛋白序列的PCR扩增 3 重组表达载体的构建 4 重组载体的表达（可以导入大肠埃希菌培养、菌体裂解） 5 蛋白表面展示的初步鉴定（结合ELISA，分光光度法鉴定重组蛋白是否成功展示在细胞表面） 综上所述，细菌表面展示系统灵活多样，操作简便，在多个领域显示出广泛的应用前景，随着新的载体系统的发展和其自身的不断完善，细菌表面展示技术必将在实践中发挥更大的作用。 酵母表面展示技术 原理 酵母细胞表面展示技 术是近年来发展较快的一种真核蛋白表达系统，其基本原理是将外源靶蛋白基因(外源蛋白) 与特定的载体基因序列融合后导入酵母细胞， 利用酵母细胞内蛋白转运到膜表面的机制使靶蛋白固定化表达在酵母细胞表面。 简介： 酵母表面展示系统是继噬菌体展示技术创立以后发展起来的展示系统。酵母的蛋白质折叠和分泌机制与哺乳动物的细胞非常相似，对人的蛋白质表达和展示具有优越性。酵母细胞颗粒大，可用流式细胞仪进行筛选和分离。目前报道的两种