高中生物课件：大肠杆菌的分离与培养ppt（2020选修一）.pptx

大肠杆菌的培养与分离; 1、肠道微生物的种类很多。 大肠杆菌是G-、兼性厌氧、37℃ 在肠道中无害 在伊红-美兰鉴别培养基上生长，能产生带有金属光泽的深紫色菌落而得到鉴别。;2、菌落是指单个或少数细胞在固体培养基上大量生长繁殖时，所形成的肉眼可见的具有一定形态结构的子细胞群体。不同微生物形成的菌落具有不同的特征，是鉴定菌种的重要依据。 ;3、培养基：是指人工配制的适合微生物生长繁殖或积累代谢产物的营养基质。用途：培养、分离、鉴定、保存各种微生??或积累代谢产物。组成：碳源、氮源、无机盐、生长因子、水种类：按培养的微生物划分： （1）天然培养基、合成培养基、半合成培养基 （2）固体培养基、半固体培养基、液体培养基 （3）基础培养基、鉴别培养基、选择培养基 ;（二）实验方法与步骤 ;3、培养基制作过程 称量 熔化 调pH 分装 加塞、包扎 无菌检查 搁置斜面 121℃、20’ ：灭菌;试管培养基的分装;培养基的分装： 三角瓶：固体 培养皿培养 液体 摇瓶或静置培养 试管： 固体 斜面或柱状培养 液体 摇床或静置培养;消毒与灭菌;基本原理 高压蒸汽灭菌是将待灭菌的物品放在一个密闭的加压灭菌锅内，通过加热，使灭菌锅隔套间的水沸腾而产生蒸汽。待水蒸气急剧地将锅内的冷空气从排气阀中驱尽，然后关闭排气阀，继续加热，此时由于蒸汽不能溢出，而增加了灭菌器内的压力，从而使沸点增高，高于100℃，致使菌体蛋白质凝固变性而达到灭菌的目的。;高压蒸汽灭菌： 是湿热灭菌中最好的方法，通常在1kg/cm2的压力下面（此时温度121oＣ）处理15min。;高压蒸汽灭菌;二、大肠杆菌的培养与分离;2、大肠杆菌的划线分离 （1）倒平板： ;（2）培养与分离： 平板划线分离法 用接种环挑取少量的菌液在伊红-美蓝培养基平板上进行划线分离，将平板倒置于37℃培养箱培养12-24h。 稀释涂布平板法 ;;（3）观察结果： 伊红-美兰鉴别培养基上观察菌落特征,是否符合下列特征： ①深紫黑色、有金属光泽； ②紫黑色、不带或略带金属光泽； ③淡紫红色、中心颜色较深。 ;3、斜面接种和菌种保存; 1.灭菌;三、结果分析;三、油镜的使用和大肠杆菌的简单染色; 2、操作步骤： 涂片 干燥 固定 染色 水洗 干燥 镜检 ;大肠杆菌;（1）低倍镜、高倍镜观察： 粗调、细调。依次从低倍、高倍进行观察。 （2）油镜观察： 在10倍镜下找到清晰的物象后，在标本中央滴一滴香柏油，使油镜镜头浸入香柏油中，细调至看清物象为止。 （3）复原和维护： 观察完毕，上升镜筒，先用擦镜纸擦去镜头上的油，然后再用擦镜纸沾取少量无水酒精擦去残留的油，最后用擦镜纸擦去残留的无水酒精，后将镜体全部复原。;作业与思考