培训3-植物基因工程技术及应用.ppt

精选ppt 二元整合转化程序 将外源基因克隆在大肠杆菌-农杆菌穿梭质粒的T-DNA区内； 重组质粒直接转化农杆菌株，该菌株携带只含vir区不含T-DNA区的Ti辅助质粒； （2）农杆菌介导外源基因转移技术的一般操作 ①将表面消毒的叶片切成小块 ②小块在过夜培养并稀释到一定浓度的含外源基因的根癌农杆菌液中共培养几分钟，使让根癌农杆菌感染叶片切块的伤口。 ③从菌液中捞出小叶块，培养基中培养2天。 ④在含头孢霉素选择培养基中筛选转化细胞。继续培养，转化的细胞分化出芽。 ⑤将芽转入含有抗生素的生根培养基上，诱导生根。 ⑥将完整的转基因植株移栽到土壤中。 a b c d 分子鉴定 : PCR Southern blot Northern blot Western blot 蛋白质电泳 5. 转基因植株的鉴定及分析 Southern blot Northern blot Western blot和蛋白质电泳 （三）转基因生物商业化的一般流程 　1. 实验室试验环节：通过了实验室的试验，技术成熟之后才开始进行中间试验环节。 2. 中间试验环节：这个环节在田间进行，一般需要两年左右的时间。田间的管理评价包括具体位置、与人群的距离、面积、隔离等多项具体规定。 3. 环境释放评价：需