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观察植物细胞的有丝分裂
授课老师:宋宏涛
2005.10.16
实验原理
细胞核内的染色体容易被碱性染料(龙胆紫)着色
植物的有丝分裂常见于根尖,茎尖的分生区细胞
根据染色体的行为变化判断各个时期
实验步骤
蒜的根尖预培养(已完成)
解离:
何为解离?目的?
主要是使得细胞彼此分开
解离要注意的几点:
剪取根尖的长度2-3mm
立即放入盛有适量解离液的玻璃皿中
室温解离4分钟最佳(酥软,不能太硬也不能太软)
用镊子轻轻取出根尖
实验步骤
漂洗
用镊子去除根尖后放入盛有清水的玻璃皿中漂洗3分钟 ( 思考:目的?)
需要注意:
动作轻,不要把根尖弄碎
(可以利用这一段时间观察马蛔虫有丝分裂的固定装片)
实验步骤
染色
再次轻轻取出漂洗干净的根尖放入滴有一滴龙胆紫的在载玻片上,染色30S
染完之后用吸水纸将多余的染液除去,再加一滴请水。
需要注意:
夹取根尖时一定要注意不要夹根尖头部,可以夹取根尖的后部。
染色的时间控制(预实验1min)
过长过短都不好,为什么???(深,浅)
实验步骤
制片
观察
显微镜的使用(回顾,演示)
低倍镜观察
慢慢移动装片找到分生区细胞
特征:较小,呈正方形,排列紧密,有的正在分裂
换高倍镜观察
用细准焦螺旋和反光镜调节视野清晰
找到有丝分裂前,中,后,末期的细胞,并用铅笔绘图。
观察
注意:
在一个视野中处于分裂期的细胞是少数的,绝大多数的细胞处于??期,为什么??
一个视野中很难找全各个时期的细胞,可以慢慢移动装片,从临近的视野中找。
看马蛔虫受精卵的有丝分裂固定装片
注意:动物与植物细胞有丝分裂有何区别?
后期
中期
蒜的根尖预培养(已完成)
解离
剪取根尖的长度2-3mm
立即放入盛有适量解离液的玻璃皿中
室温解离4分钟最佳(酥软,不能太硬也不能太软)
用镊子轻轻取出根尖
漂洗
用镊子取出根尖后放入盛有清水的玻璃皿中漂洗3分钟
需要注意:动作轻,不要把根尖弄碎
染色
再次轻轻取出漂洗干净的根尖放入滴有一滴龙胆紫的载波片中,染色30S
需要注意:
夹取根尖时一定要注意不要夹根尖头部,可以夹取根尖的后部。
染色的时间控制(预实验1min)
制片
盖盖玻片时要从一侧接触,慢慢放下,注意不要产生气泡;
压片时不要太用力,轻轻敲打数次,只要细胞散开既可。
利用漂洗的时间观察固定装片
思考题:
1.动物与植物细胞有丝分裂有何区别?
2.结合理论课知识找到有丝分裂前,中, 后,末期的细胞,并把你看到的最好的一个细胞绘图。
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