蛋白质分子基础蛋白质制备.pptxVIP

蛋白质的层析分离;层析法的一般原理;32;塔板理论;离子交换层析;离子交换层析;离子交换剂的基本类型;离子交换的支持物;层析条件的选择;柱层析技术;离子交换剂的再生;第12页/共51页;层析一般步骤：;离子交换层析过程图;离子交换层析过程图;习题;习题;凝胶过滤层析;第19页/共51页;交联葡聚糖的物理性质;凝胶过滤测定样品分子量(10 kDa-250 kDa);凝胶过滤层析过程示意图;疏水层析;疏水吸附剂的制备;选择疏水胶的原则;疏水层析柱的洗脱;疏水柱的再生;疏水层析过程示意图;亲和层析;亲和层析;亲和层析配体的???择;亲和层析常用配体;亲和层析的洗脱;;亲和层析过程示意图;几种特殊的亲和层析;免疫亲和层析;免疫亲和层析纯化人干扰素;共价层析;-S-S-;金属螯合层析;;样品: 5 ml大肠杆菌表达含(His)-标记 谷胱甘肽转移酶，GST-(His)6柱: HiTrap Chelating 1 ml, 加 Ni2+ 结合缓冲液: 1X 磷酸缓冲液, 20 mM 咪唑 洗脱缓冲液: 1X 磷酸缓冲液, 500 mM咪唑 流速: 2 ml/min, 312 cm/h 结果: 洗脱 GST-(His)6, 4 ml,  A280: 1.65 总量: 4.46 mg;高效液相层析(HPLC);HPLC层析仪结构示意图;;第47页/共51页;第48页/共51页;第49页/共51页;层析一般步骤：;感谢您的观看！