MLPA技术原理2解读.pptVIP

MLPA技术原理 MLPA 技术原理 王晓琳 * . 2002 年，荷兰科学家发明了一种名为多重连接探针扩增技术(multiplex ligation-dependent probe amplification， MLPA) 的高通量的基因检测方法，该技术利用核酸杂交、连接反应和 PCR 扩增反应，可以在同一反应管内对多达 45 种不同的核苷酸序列进行检测和定量分析。 MLPA 技术原理 * . 该技术主要包括：探针与靶序列的杂交、探针的特异化连接、连接探针的扩增和结果的检测分析。针对每一个待测靶基因序列，均有一对 MLPA 探针，其由一个短的寡核苷酸片段（短探针）和一个长的寡核苷酸片段（长探针）组成。该技术的特色之一是仅扩增连接完好的探针，而不是扩增样本靶序列。 MLPA 技术原理 * . 该技术的扩增环节仅需 2 条引物，一是引物 GP1，另一是引物 GP2。在所有短探针的 5’端均有一段共同序列，该序列与引物 GP1 的核酸序列相同；在所有长探针的 3’端均有一段共同序列，该序列与引物 GP2 的核酸序列互补。可见，所有连接探针的 PCR 扩增用的是同一对引物。 MLPA 技术原理 * . 若两探针连接，则扩增可进行；而若两