核医学教学课件：体外放射分析技术.pptVIP

分离 　加分离试剂500μl 　充分摇匀室温放置15min 离心 　3500转/min，离心15min 弃上清后测沉淀放射性计数 绘制标准曲线 查待测物含量 基本操作步骤 RIA 小 结 灵敏度高 特异性好 精确的定量 方法操作简便 第二节  免疫放射分析法 （immunoradiometric assay,IRMA） *Ab + Ag-*Ab + *Ab B% Ag （B） （F） 在体外, 利用Ag与过量的*Ab的非竞争性结合反应，通过测定放射性复合物的量来计算出Ag 量。标记抗体，抗体是过量的。 基 本 原 理 IRMA与RIA工作原理的主要区别 RIA IRMA 竞争性抗原抗体结合反应 非竞争性抗原抗体结合反应 采用标记抗原 采用标记抗体 三种主要反应试剂 二种主要反应试剂 所用抗体是限量的 所用抗体是过量的 *AgAb的量与待测Ag的量呈负相关 Ag*Ab的量与待测Ag的量呈正相关 反应到达平衡慢 反应到达平衡快 非特异结合主要影响高剂量区 非特异结合主要影响低剂量区 低剂量区有不确定因素 低剂量区无不确定因素 B% B% 拟合的标准曲线 拟合的NSB 拟合的标准曲线 拟合的NSB IRMA的标准曲线及非特异结合曲线 RIA的标准曲线及非特异结合曲线 IRMA和RIA低剂量区的不确定因素示意图 RI