DB34∕T 1363-2022 饲料中喹烯酮的测定 高效液相色谱法.docxVIP

ICS 65.120 CCS B 46 34 安 徽 省 地 方 标 准 DB34/T 1363—2022 代替DB34/T 1363-2011 饲料中喹烯酮的测定高效液相色谱法 Determination of quinocetone in feed content—High performance liquid chromatography method 2022-06-29发布 2022-07-29实施 安徽省市场监督管理局 发布 DB34/T 1363—2022 前 言 本文件按照GB/T 1.1—2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定 起草。 本文件代替 DB34/T 1363-2011《饲料中喹烯酮的测定-高效液相色谱法》，除编辑性修改外主要技 术变化如下： a) 增加方法检出限、定量限； b) c) d) e) f) g) 修改了原理（见第4章）； 修改了试剂和材料内容（见第5章）； 增加了仪器设备（见第6章）； 更改了样品制备（见第7章）； 修改“色谱条件”（见第8章）； 修改了结果计算与表述（见第8.4章）。 请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。 本文件由安徽省兽药饲料监察所提出。 本文件由安徽省农业农村厅归口。 本文件起草单位：安徽省兽药饲料监察所、安徽华测检测技术有限公司、阜阳市农业综合行政执法 监督支队、萧县畜牧兽医水产服务中心、岳西县农业农村局、淮北市畜牧中心，安徽农业大学、安徽省 农业科学院畜牧兽医研究所。 本文件起草人：刘发全、谢军池、纵丰学、朱明齐、王文风、袁琪、束玲玲、许晓靖、李佳庆、吴 敏、吴昊、许世富、邵颖、潘孝成、宋亚伟。 ——2011年首次发布为 DB34/T 1363-2011，2022年第一次修订。 I DB34/T 1363—2022 饲料中喹烯酮的测定 高效液相色谱法 1 2 范围 本文件规定了饲料中喹烯酮含量的高效液相色谱测定方法。 本文件适用于配合饲料、浓缩饲料和预混合饲料中喹烯酮含量的测定。 本方法检出限为 0.5 mg/kg，定量限为 1.0 mg/kg。 规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件， 仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本 文件。 GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法 GB/T 20195动物饲料试样的制备 3 4 术语和定义 本文件没有需要界定的术语和定义。 原理 试样中的喹烯酮用乙腈甲醇磷酸溶液超声提取，经离心、过滤后，高效液相色谱分离，紫外检测器 测定，外标法定量。 5 试剂和材料 除特殊说明外，本方法所用试剂均为分析纯，水为符合 GB/T 6682规定的一级水。 甲醇：色谱纯。 乙腈：色谱纯。 二甲基甲酰胺。 磷酸。 0.025 mol/L磷酸溶液：称取 85％的磷酸（5.5） 2.88 g，加水稀释至 1000 mL。 流动相：乙腈-甲醇-（0.025 mol/L）磷酸溶液，按体积比 25：20：55（v/v）。 标准品：喹烯酮标准品（CAS号： 81810-66-4），纯度≥ 98.0％。 喹烯酮标准溶液的制备如下： a) 标准溶液储备液（0.5 mg/mL）：取喹烯酮标准品 50 mg，精密称定，用 10 mL二甲基甲酰胺 溶解后，加入甲醇定容至 100 mL棕色容量瓶，配制成浓度为 0.5 mg/mL的标准储备液，于 4℃冰箱中保存，有效期二个月。 1 DB34/T 1363—2022 标准工作溶液：分别吸取储备液（5.9-a））1 mL、2 mL、5 mL、10 mL、20 mL于 100 mL棕 b) 色容量瓶，用流动相溶液（5.7）定容，标准工作溶液系列浓度分别为 5 μg/mL、10 μg/mL、 25 μg/mL、50 μg/mL、100 μg/mL。 6 仪器和设备 高效液相色谱仪：配紫外检测器。 分析天平：感量 0.1 g、0.1 mg、0.01 mg。 离心机：≥ 8000 r/min。 超声波仪。 分析筛：孔径 0.42 mm。 粉碎机。 微孔滤膜：孔径 0.45 μm有机滤膜。 7 8 试样的制备 按GB/T 20195的规定制备，磨碎，全部通过分析筛（6.5），混匀，装入磨口瓶中备用。 分析步骤 试样的提取 称取试样适量（配合饲料 5.0 g、浓缩饲料 3.0 g、预混合饲料 1.0 g），精确至 0.1 g，置于 100 mL具塞锥形瓶中，准确加入流动相 50 mL，超声提取 30 min，移取 10 mL至离心管，以 8000 r/min离心 10 min，取离心上清液过 0.