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小鼠胚胎早期发育过程中OCT4作用的研究进展 　　摘要：oct4属于pou转录因子。目前对于oct4基因的研究认为在鼠和人体内，oct4主要表达于胚胎干细胞及生殖细胞中，对于维持胚胎干细胞的多能性和自我更新有十分重要的作用，对于胚胎早期发育具有重大意义。但是目前oct4在小鼠早期胚胎中的结合位点还不清晰，应进一步深入研究oct4基因构建oct4在小鼠早期胚胎发育过程中的调控网络，为揭开胚胎早期发育调控机制的面纱提供重要参考。 　　关键词：小鼠;oct4;早期胚胎发育;胚胎干细胞;调控网络 　　中图分类号：q813文献标识码：b文章编号：2095-9737（2020）02-0007-03 　　小鼠是解析人类基因功能最重要的模式生物，是研究人类疾病发病机制的理想模型。小鼠和人类有类似的生理解剖构造和胚胎发育过程，染色体组成和人类的类似：小鼠有19条常染色体（人类有22条），还有x和y性染色体，而且小鼠许多基础生物学以及行为学过程与人类类似，同时对其基因组序列的分析表明，99%的人类编码基因都可以在小鼠基因组中找到对应的同源基因，同时染色体上基因之间的排列关系也在小鼠和人类基因组中高度保守[1]。这些数据为运用小鼠基因敲除技术和转基因技术研究人类基因功能提供了重要的理论基础。 　　oct4是指位于人类基因组第6号染色体上的pou5f1基因编码的oct4a亚型。它属于pou家族蛋白class5变体1，因此其基因名被称为pou5f1。oct4是pou家族转录因子的一个八进制结合子群，它通过一个称为pou域的二部dna结合域与八聚体motif（consensussequenceatgcaaat）结合[2]。pou域由两个螺旋-转角-螺旋dna结合域组成，通过可变连接区域连接。在pou家族中，pou特异性结构域（pous）和pou同源结构域（pouhd）都是保守的，pou家族蛋白可以與被调控基因启动子或增强子中的顺式作用元件结合发挥转录调控作用。1989年，由schler等人首次在小鼠原始生殖细胞、卵母细胞和体外培养的胚胎干细胞中发现[3-4]。oct4的早期研究是描述性的，并着眼于确定oct4在胚胎以及胚胎来源的多能细胞系中的功能作用。 　　1oct4基因在胚胎发育中作用的研究进展 　　oct4转录因子最初作为卵母细胞中的母体因子具有活性，并且整个植入前期在胚胎中保持活性。oct4表达与未分化的表型和肿瘤相关。oct4被发现是一种特异于早期胚胎发生的转录因子，它是小鼠胚胎植入前发育过程中的关键调控因子，它在20多年前的三项独立研究中被鉴定出来，这些研究使用不同胚胎阶段的核提取物和ecc系的核提取物来鉴定在胚胎早期发育中具有特定功能的转录因子。利用其与八聚体基序的特异性结合能力，oct4在不同的ecc系、未受精卵母细胞、早期胚胎和原始生殖细胞（pgcs）中均有表达，但在成体组织中未见表达。因此，oct4是一种转录因子，在早期胚胎发生中起重要作用。其表达仅限于发育后期的生殖系[3-5]。 　　在小鼠中，成熟卵母细胞中存在oct4mrna。在八细胞期，oct4的表达达到一个更高的水平。随后，oct4的表达被限制在内细胞团（icm）中。在胚胎发育后期，oct4的表达仅维持在原始生殖细胞（pgcs）中[5]。 　　研究者检测了人胚泡中pgcs的表达。分离17例人胚泡的icm和te，分别用rt-pcr[6-7]检测oct4mrna水平。结果表明，全能icm细胞中oct4的平均表达量是分化的te细胞的30倍。这些研究表明，oct4在小鼠和人类细胞中的表达模式非常相似。 　　在小鼠中，pou5f1基因与17号染色体上的主要组织相容性复合体（mhc）非常接近[8]。准确的位置被映射在mhc的q和t区域之间。人类pou5f1基因定位于6号染色体，与小鼠pou5f1有87%的序列相同，显示出高度的进化保守性。这两个基因都由5个外显子和4个内含子组成。在小鼠中，pou5f1基因转录从一个不包含tata-box序列的近端启动子的gc富集区域的几个位点启动。启动子包括由ra诱导的孤核受体靶向的反应元件，以及特异性蛋白1（sp1）的结合位点，因此被认为在ra诱导的分化过程中发挥作用。即oct4的表达是通过pou5f1基因内的多个调控元件来调控的。 　　oct4在早期细胞的命运决定中发挥作用。其中两个最具启发性的例子是：oct4与cdx2在囊胚中的表达相互负调控，oct4对fgf4表达的调控。cdx2是调节滋养外胚层谱系的关键转录因子，其在escs中的过表达通过抑制oct4表达诱导滋养外胚层谱系分化。 　　研究表明，小鼠卵母细胞中存在母源oct4，随着受精和合子基因激活合子来