DNA的粗提取与鉴定.pptVIP

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  • 2022-09-05 发布于浙江
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实验材料的选取 材料:鱼卵、猪肝、菜花(花椰菜)、香蕉、鸡血、猕猴桃、洋葱、豌豆、菠菜、在液体培养基中培养的大肠杆菌 原则上,凡是含有DNA的生物材料都可以考虑,但是,选用DNA含量相对较高的生物组织,成功的可能性更大 鸡是真核生物,真核生物的DNA都在染色体上。 鸟类的血细胞核大,DNA多 不需要破除细胞壁 问题:鸡血细胞液在取材之后,到实验前,是否需要特殊处理吗? 柠檬酸钠抗凝 一、实验原理 ①、DNA在不同浓度的NaCl溶液中的溶解度不同,在0.14 mol/L的NaCl溶液中的溶解度最低。利用这一原理,可以使溶解在氯化钠溶液中的DNA析出。 ②、DNA不溶于酒精溶液,但是细胞中的某些物质则可以溶于酒精溶液。利用这一原理,可以进一步提取出杂质较少的DNA。 ③、DNA遇二苯胺(沸水浴)会染成蓝色。因此,二苯胺可以作为鉴定DNA的试剂。 二、目的要求 初步掌握DNA粗提取和鉴定方法,观察提取出来的DNA物质。 三、材料: 鸡血细胞液(5-10ml),体积分数为95%的酒精溶液(冷却),蒸馏水,质量浓度为0.1g/ml的柠檬酸钠溶液,物质的量浓度分别为2mol/l和0.015mol/l的氯化钠溶液,二苯胺试剂 取质量浓度为0.1g/ml的柠檬酸钠溶液(抗凝剂)100ml,置于烧杯中,将新鲜鸡血180ml注入,同时用玻璃棒搅拌,以免凝血,然后倒入离心管中用100

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