血清蛋白聚丙烯酰胺凝胶电泳.pptVIP

3.绘制标准曲线： 取6支试管，编号后分别加入0mL、、、、、标准蛋白质溶液(BSA)，然后各管分别用去离子水补充到，最后各试管中分别加入工作液，每加完一管，立即在漩涡混合器上混合（注意不要太剧烈，以免产生大量气泡而难于消除），以蛋白质的蛋白含量为横坐标、吸光度A为纵坐标绘制标准曲线。 4.样品测定： 同绘制标准曲线方法，在一支试管中加入待测样品代替标准蛋白质溶液，然后加入工作液后，立即在漩涡混合器上混合，测吸光度A，查标准曲线，求出待测样品中蛋白质浓度（g/L）。 【优缺点】 (一) 操作简单，快速，45分钟内完成测定，比经典的Lowary法快4倍且更加方便； (二) 准确灵敏，试剂稳定性好，BCA试剂的蛋白质测定范围是20-200μg/ml，微量BCA测定范围在。 (三) 经济实用，除试管外，测定可在微板孔中就进行，大大节约样品和试剂用量； (四) 抗试剂干扰能力比较强，如去垢剂，尿素等均无影响 此法测定蛋白质浓度，近些年被科研工作者广泛选用。目前BCA法的试剂盒市面有售。 BCA蛋白浓度测定试剂盒(BCA Protein Assay Kit)是根据目前世界上最常用蛋白浓度检测方法之一BCA法研制而成，实现了蛋白浓度测定的简单，高稳定性，高灵敏度和高兼容性。检测浓度下限达到25 微克/毫升，最小检测蛋白量达到微克，待测样品体积为1～20微升。 试剂盒