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蝴蝶兰的组织培养研究 【摘要】自古以来，人们都有发现美、欣赏美的艺术追求。花卉等具有“美”的特质的植物理所当然的成为了养殖、欣赏的对象。在几十年以前，我国人民尚徘徊在生存的边缘，无暇追求美丽事物，随着我国社会经济的发展，人们生活水平的也逐渐提升，人们越来越重视生活中的美。花卉作为人们欣赏美的载体，不论是各类庆典、宴会，还是环境绿化建设等都是不可或缺的。蝴蝶兰的花形奇特，类似蝴蝶，色彩艳丽鲜明，花期持久，是最适合作为观赏植物的花种之一。　　【关键词】蝴蝶兰组织培养培育材料培育方法激素配方　　蝴蝶兰具有极高的观赏价值和经济价值，是当今国际上商业价值最大的热带兰花之一。但因为蝴蝶兰属于单茎性气生兰，其再生能力不强，因此要进行分株繁殖显得异常困难。蝴蝶兰的种子十分细小，在一般的自然条件下很难发芽，这也导致其增殖系数极低。虽然其有较高的观赏价值，但是因为不易养殖，所以在市场上的蝴蝶兰显得极为珍贵。为了提高蝴蝶兰的繁殖力，相关的专家人员利用组织培养法进行蝴蝶兰的快速繁殖，并取得了成功。蝴蝶兰的组织培养程序为：选取外植体――诱导形成不定芽――增殖不定芽――分化小植株――生根壮苗培养――温室移栽。这整个程序都是根据蝴蝶兰的生长习性而设计的，对蝴蝶兰的培育有着显著效果，解决了以前在蝴蝶兰工厂化快速繁殖中遇到的技术问题，增加了蝴蝶兰的成活率。本文就蝴蝶兰的组培方案进行了分析，首先阐述了蝴蝶兰组织培育中必须要准备的材料，然后阐述了蝴蝶兰组织培育的方法。期望通过本文的分析，能够让读者对蝴蝶兰的组培方案有更加深刻的认识。　　1蝴蝶兰组织培育中必须要准备的材料　　在蝴蝶兰组织培育中可以作为外植体的有蝴蝶兰的嫩茎、花梗、叶片、茎段、茎尖等。必须要确保所取外植体的原蝴蝶兰没有虫害、没有病害，生长状态要极好。本文所选蝴蝶兰是白瓣红唇蝴蝶兰。若取花梗作为材料，则要剪去上端无须的花梗，剪成长度为五至十厘米的小段。若取叶片为材料，则要先取花梗进行诱导，当获得蝴蝶兰无菌苗后，待其成长为2叶苗时，再取其叶片或是茎尖作为培育材料。　　2蝴蝶兰组织培育的方法　　2.1不同外植体的消毒　　不同外植体的消毒可分为三个步骤，下面就对这三个步骤进行仔细分析。　　（1）第一步：在取得蝴蝶兰的培育材料以后，需要先对其进行清理，去除多余的部分，将主要的部分清洗干净。然后将材料剪成适当大小，以能放入灭菌容器中的大小为宜。将剪好的培育材料放在水龙头下冲洗，冲洗的时间要根据材料的清洁程度而定，可能是几分钟，也可能是几小时。在污染严重的情况下，流水清洗是最有效的清洁方式。在清洗的过程中，可以适当加入少量的洗衣粉，洗衣粉能够很容易的去除附着在材料上的污物，尤其是脂质性的污物。再用自来水将洗衣粉水清洗干净。为了使清洗的效果更好，还可以适当的加入表面活性物质――“吐温”。　　（2）第二步：培育材料的表面浸润灭菌。首先要准备好灭菌的器械，比如玻璃棒、烧杯、无菌水、70%酒精、消毒液等等。先在烧杯中倒入消毒溶液，并加几滴消毒助剂tween-80，在消毒的过程中要不断的用玻璃棒进行轻轻搅动，这样有助于消毒液与培育材料的充分接触，能够驱除气泡，使消毒更为彻底。在设计的消毒时间结束之前的一到两分钟，就可以将消毒液慢慢倾入另一个烧杯，切记不要将材料也倒入另一个烧杯。在消毒液倒完以后，立即注入无菌水进行涮洗，涮洗结束以后，再用自来水冲洗30～60min。接着在超净工作台上，将已经切割好的材料用准备好的酒精清洗半分钟时间，再用无菌水进行冲洗，完成以后，如果所取材料是叶片，则将其放入0.1%hgci溶液中浸泡八到十二分钟左右的时间，再用无菌水冲洗五到八次；如果所取材料是花梗，则将其放入0.1%hgci溶液中浸泡十到二十分钟，再使用无菌水冲洗三到五次。　　（3）第三步：使用无菌水涮洗。无菌水涮洗的主要目的是免除消毒剂对材料细胞的副作用，在使用无菌水涮洗的过程中，必须要坚持涮洗五到十次，每次清洗都要确保持续时间在30s以上。其中必须要注意的几点：1）在酒精中浸泡的时间要短，避免因浸泡过久导致材料失绿；2）对于老熟材料，比如种子等，要在酒精中浸泡久一点；3）升汞的渗透力较弱，可以多浸泡一些时间；4）在消毒液中加入浓度在0.08%～012%之间的tween-20或是tween-80，能够降低植物材料表面的张力，使消毒效果更加明显。　　2.2培养基激素配方　　初代培养的目的是为了诱导类不定芽（plb）或丛生芽，基本培养基为2/3ms培养基。在培养基中均要加入蔗糖、琼脂、碳粉等，蔗糖的加入量为20mg.l-1，琼脂的加入量为5mg.l-1，碳粉的加入量为ac1.0mg.l-1。接种之后，将其放入暗培养室25～30小时，再改为光照培养，此时温度应该控制在23～25℃之间，日光灯照明的强度为2000lux，光照时间设定为10h